[发明专利]氧化低分子量肝素-抗凝血酶复合物制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种氧化低分子量肝素-抗凝血酶复合物的制备以及将其用于改善体外循环管道血液、生物相容性的涂层方法。首先通过高碘酸钠氧化低分子量肝素，然后与抗凝血酶发生非酶糖基化反应，经离心超滤和二乙基氨基乙基-琼脂糖快流速阴离子交换层析而得到纯化的氧化低分子量肝素-抗凝血酶复合物，再应用聚乙烯亚胺-戊二醛结合技术将该氧化低分子量肝素-抗凝血酶复合物固定于体外循环管道表面。本发明所制备出的氧化低分子量肝素-抗凝血酶复合物涂层体外循环管道具有较肝素涂层和低分子量肝素涂层体外循环管道更佳的涂层稳定性、抗凝血性能和生物相容性，减轻了血液与体外循环管道表面接触所引起的炎性介质生成、释放和凝血系统激活。

主权项

一种氧化低分子量肝素-抗凝血酶复合物制备方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：（1）将高碘酸钠和低分子量肝素钠注射液中进行室温避光反应，然后采用离心超滤装置进行超滤离心，得到氧化低分子量肝素钠溶液；（2）将步骤（1）得到的氧化低分子量肝素钠溶液与抗凝血酶在磷酸盐缓冲生理盐水中进行第一次水浴反应，促使氧化低分子量肝素的终末醛糖残基与抗凝血酶的赖氨酸残基的ε-氨基发生非酶糖基化反应而生成希夫碱，并进而发生阿马多利分子重排形成稳定的共价复合物，然后加入氰基硼氢化钠溶液进行第二次水浴反应，以还原未发生阿马多利分子重排的希夫碱，得到氧化低分子量肝素-抗凝血酶复合物和未共价结合的抗凝血酶及氧化低分子量肝素的混合溶液；（3）将步骤（2）得到的混合溶液首先通过离心超滤装置进行超滤离心；然后用三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液透析；随后利用二乙基氨基乙基-琼脂糖快流速阴离子交换层析进行纯化；最后经过磷酸盐缓冲生理盐水透析，得到氧化低分子量肝素-抗凝血酶复合物溶液。