[发明专利]一种适用于蕨类植物稻草人的组培快速繁殖方法

摘要

本发明涉及一种适用于蕨类植物稻草人的组培快速繁殖方法，属于生物技术领域。以MS为基本培养基，加入了生长调节类激素物质6-BA、NAA、KT、IAA和辅助剂活性炭等，用于稻草人苔藓状丛生微芽的诱导、微丛芽发育、成苗三个关键培养阶段。苔藓状丛生微芽经一年的继代增殖，其繁殖系数仍然达到5.0以上。采用本发明所提供的成套技术对蕨类植物稻草人进行种苗快速繁殖，达到了规模化生产的要求，为蕨类植物稻草人的工厂化生产提供一种周期短、繁殖率高、成本低廉的育苗方法。微丛生芽还可作为诱变处理的理想材料，在诱变育种方面具有良好的应用前景。

主权项

一种适用于蕨类植物稻草人的组培快速繁殖方法，包括苔藓状微丛芽的诱导、微丛芽发育、成苗三个主要培养阶段，其特征在于：1)培养条件：基本培养基为MS的大量元素、微量元素及有机成分；附加：激素6-BA，KT，NAA和IAA以及吸附剂活性炭；培养基在高压灭菌前用氢氧化钠或盐酸调整pH值至5.9±0.05；培养温度25±1℃，光照时间12h/d，光照强度为1500-2000Lx；2)苔藓状微丛芽的诱导：使用MS+6-BA1.0mg/L+NAA 0.3mg/L作为诱导培养基，将蕨类植物稻草人无菌组培苗丛转接到该培养基上，培养3-5周，苗丛周缘诱导出表面为绿色细绒状，外观似苔藓的微丛芽；3)苔藓状微丛芽的继代增殖：为维持微丛芽的结构不变并进行增值，当稻草人无菌组培苗丛周缘诱导出苔藓状微丛芽后，将其切成3×3mm的小块，接种于MS+6-BA1.0-4.0mg/L+NAA0.3mg/L培养基上，每3-5周继代一次；4)微丛芽的诱导发育：将经继代增殖的苔藓状微丛芽转接于MS+KT0.5mg/L+IAA0.1mg/L培养基上培养3-5周，丛芽继续生长发育，同时产生一些增厚的肉质叶丛，外观由苔藓状转化为叶丛状；5)成苗培养：将叶丛状微丛芽切成3×3mm的小块，接入成苗培养基MS+KT0.5mg/L+IAA0.1mg/L+质量比0.1％活性炭中，经3-5周培养后，叶丛状微丛芽进一步发育形成许多小苗；6)生根培养：将诱导出的株高在1cm以上的有效苗尽量切分成单株或2-3株一丛，使用MS+NAA0.1mg/L+活性炭0.1％作为生根培养基培养3-5周，诱导小苗生根和壮苗；7)移栽：将根系发育好的植株取出，移栽到珍珠岩∶泥炭土为1∶1-1.5的混合基质中。