[发明专利]一种适用于蕨类植物稻草人的组培快速繁殖方法

说明书

一、技术领域

本发明涉及一种适用于蕨类植物稻草人的组培快速繁殖方法，属于生物技术领域。

二、背景技术

蕨类有约12000种，许多种类形态优美，是著名的观叶植物。我国拥有大量可供观赏栽培的蕨类植物资源，已被利用的只占很少一部分。近年来蕨类植物以它奇特的株形、飘逸的叶形和极富质感的叶片越来越受到人们的青睐，在我国的种植和销售逐年增加，市场潜力巨大。目前，我国不少蕨类尤其是高档蕨类种苗需求量很大。但是生产上主要采用分株、压条、扦插等营养繁殖和孢子繁殖方法，繁殖系数低，种苗生产慢，难以满足日益增长的市场需求。采用植物组织培养技术繁殖组培苗，可达到繁殖速度快、量大、生长整齐、质量稳定等目的，能够满足大规模现代化商品化生产的需要。稻草人(Pteris straminea)是凤尾蕨属一种具有较高观赏价值的蕨类植物，目前尚无有关蕨类植物稻草人组织培养快速繁殖种苗的报道。

三、发明内容

本发明的目的是提供一种适用于蕨类植物稻草人的组培快速繁殖方法。首先由稻草人无菌组培苗丛诱导出苔藓状微丛芽、然后用活性较强的细胞分裂素抑制微丛芽的发育并进行继代增殖，在成苗前用活性较弱的细胞分裂素诱导微丛芽继续发育并转变为叶丛状，接着通过成苗培养使微丛芽进一步发育生长，最终形成大量小苗。

技术方案

一种适用于蕨类植物稻草人的组培快速繁殖方法，包括苔藓状微丛芽诱导、微丛芽发育、成苗三个主要培养阶段，其特征在于：

1)培养条件：

基本培养基为MS大量元素、微量元素及有机成分；

附加：激素6-苄基氨基嘌呤6-BA，激动素KT，萘乙酸NAA，3-吲哚乙酸IAA和吸附剂活性炭。

培养基在高压灭菌前用氢氧化钠或盐酸调整pH值至5.9±0.05；

培养温度25±1℃，光照时间12h/d，光照强度为1500-2000Lx；

2)苔藓状微丛芽的诱导：使用MS+6-BA1.0mg/L+NAA 0.3mg/L作为诱导培养基，将蕨类植物稻草人无菌组培苗丛转接到该培养基上；培养3周诱导出的微丛芽，表面为绿色细绒状，外观似苔藓。

3)苔藓状微丛芽的继代增殖：为维持微丛芽的结构不变并进行增值，当稻草人无菌组培苗丛周缘诱导出苔藓状微丛芽后，可将其切成3×3mm的小块，接种于MS+6-BA1.0-4.0mg/L+NAA0.3mg/L培养基上，每3-5周继代一次；

4)微丛芽的诱导发育：将经继代增殖后的苔藓状微丛芽转接于MS+KT0.5mg/L+IAA0.1mg/L培养基上培养3-5周，丛芽进一步生长发育，同时产生一些增厚的肉质叶丛，外观由苔藓状转变为叶丛状；

5)成苗培养：将叶丛状微丛芽接入成苗培养基MS+KT0.5mg/L+IAA0.1mg/L+质量比0.1％活性炭中，经3-5周叶丛状微丛芽继续发育形成丛生小苗；

6)生根培养：将株高在1cm以上的有效苗切分成单株或2-3株一丛，使用MS+NAA0.1mg/L+活性炭0.1％作为生根培养基培养3-5周，诱导小苗生根和壮苗；

7)移栽：将根系发育好的植株取出，移栽到珍珠岩∶泥炭土为1∶1-1.5的混合基质中。移栽前应揭去瓶盖，加入1-2cm深的自来水，在室温条件下炼苗1-2天。

有益效果本发明的优越性在于：(1)稻草人种苗的生产可以在人为控制的条件下进行，且不受季节、气候条件与土壤因素的制约，可排除病虫害的侵袭和农药残留的影响，严格控制稻草人种苗质量。(2)类苔藓状丛生微芽丛生着大量微小的芽丛，可大量增殖并进一步繁殖种苗，也可以作为种质长期保存，便于弹性控制种苗的产量。

(3)经组培快繁获得的小苗个体差异小，品质均一。(4)增殖速度快、生产周期短、占地少、便于工厂化生产。(5)微丛芽可以进行低温、耐盐、干旱等逆境的定向诱变或辐照、化学诱变剂处理等非定向诱变，为品种选育提供了极为丰富的优质变异材料，可大大加快和提高优良品种选育的进程和效率。

四、附图说明

图1苔藓状微丛芽

图2苔藓状微丛芽向叶丛状微丛芽转变

图3叶丛状微丛芽

图4由叶丛状微丛芽诱导成苗

五、具体实施方式

1.材料和方法

1.1试验材料

蕨类植物稻草人(Pteris straminea)无菌组培苗购自中国农业科学院蔬菜花卉所。

1.2培养条件