[发明专利]一种驴皮胶原的制备方法

摘要

本发明公开了一种驴皮胶原的制备方法，以鲜驴皮为原料，通过脱毛、脱脂，碎皮、碱液浸泡，低温酶解，提取、纯化，改性等步骤，得到改性后的驴皮胶原产品。通过该方法得到的驴皮胶原产品，不仅保留了三股螺旋结构而具有生物活性，与人肌体、皮肤同源性及相容性，并且具有生物可降解性和低抗原性等特点，能被水以任性比例稀释，可用于制备外科植入物和组织工程医疗产品，开发医药、医学试剂、及保健品等。

主权项

一种驴皮胶原的制备方法，包括下述步骤：（1）脱毛、脱脂：以检验、检疫合格的鲜驴皮为原料，脱毛、脱脂后，用水洗至中性，0℃以下冷冻保存备用；（2）碎皮、碱液浸泡：取上述步骤（1）处理后备用的驴皮解冻，碎皮成20-40目的颗粒，加入pH为7.5-9.5的氢氧化钠溶液，其加入量按照驴皮颗粒质量:氢氧化钠溶液体积=1g:(8-12)ml 计算，浸泡软化48-96h；用去离子水冲洗至pH为6.0-7.0，得到中性驴皮颗粒；（3）低温酶解：取上述步骤（2）处理后的中性驴皮颗粒，加入pH为4.3-6.5的盐酸溶液，其加入量按照中性驴皮颗粒质量:盐酸溶液体积=1g:(45-50)ml计算，再加入8-10UI的胃蛋白酶，10℃以下低温放置3-4d，搅拌和静置间隔处理，搅拌的总时间与静置的总时间比为1:(1.5-2.5)，得到含有驴皮胶原的初液；（4）提取、纯化：将上述步骤（3）得到的初液离心，取得上清液，加入NaCl，充分搅拌，使驴皮胶原从溶液中析出、沉淀，静置8-16小时，取沉淀，用去离子水洗涤1-2次，得到酸溶性驴皮胶原沉淀；（5）改性：将上述步骤（4）得到的酸溶性驴皮胶原沉淀用0.2-1.0M的醋酸溶液溶解，其用量按照酸溶性驴皮胶原沉淀质量:醋酸溶液体积=1g:(45-50)ml倍量计算；测定蛋白质含量，加入丙酮作为改性剂，其加入量按照蛋白质质量:丙酮体积=1g:(10-15)ml计算；在4-8℃下，用氢氧化钠调节溶液 pH为10.0-12.0，反应5-9h，再用HCl调节pH为4.0-4.2，析出沉淀，静置8-16小时；取沉淀，甩干，用pH为4.0-4.2的盐酸溶液洗涤1-3次，得到改性后的驴皮胶原产品，即可。