[发明专利]一种简单快速适用于细菌PCR检测样品的前处理方法无效
| 申请号： | 201010171590.6 | 申请日： | 2010-05-13 |
| 公开（公告）号： | CN102242185A | 公开（公告）日： | 2011-11-16 |
| 发明（设计）人： | 段新华;王志才;王登峰;李建军;杨学云 | 申请（专利权）人： | 新疆维吾尔自治区畜牧科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/24 | 分类号： | C12Q1/24;C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 乌鲁木齐新科联专利代理事务所(有限公司) 65107 | 代理人： | 欧咏 |
| 地址： | 830000 新疆维吾尔*** | 国省代码： | 新疆;65 |
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| 摘要： | 本发明提供的一种简单快速适用于细菌PCR检测样品的前处理方法，在无菌操作下取需量的病变组织、分泌物或粪便的临床样本，接种于增菌培养液中，在37℃下恒温培养12-16小时；无菌条件下取需量的培养液，再次接种于同种增菌液中，振荡培养4-6小时；取1-2ml菌液离心，转速为5000转/min，5-6分钟得到菌体沉淀；用双蒸水洗涤菌体2-3遍后，加入100ul无菌双蒸水悬浮，在100℃下煮沸约10-12分钟，离心，转速为12000转/min，3-4分钟得上清液，即为菌粗制DNA，再进行后续的PCR分型检测即可。实验检测中作为阳性对照的标准(或参考)菌株均购自中国菌种保藏中心。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 简单 快速 适用于 细菌 pcr 检测 样品 处理 方法 | ||
【主权项】：
一种简单快速适用于细菌PCR检测样品的前处理方法，其特征在于：在无菌操作下取需量的病变组织、分泌物或粪便的临床样本，接种于增菌培养液中，在37℃下恒温培养12‑16小时；无菌条件下取需量的培养液，再次接种于同种增菌液中，振荡培养4‑6小时；取1‑2ml菌液离心，转速为5000转/min，5‑6分钟得到菌体沉淀；用双蒸水洗涤菌体2‑3遍后，加入100ul无菌双蒸水悬浮，在100℃下煮沸约10‑12分钟，离心，转速为12000转/min，3‑4分钟得上清液，即为菌粗制DNA，再进行后续的PCR分型检测即可。
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