[发明专利]牙鲆优良品种的杂交育种方法

摘要

一种牙鲆优良品种的杂交育种方法，采用人工选择、杂交、生长性能评定和抗感染能力测定等技术建立了牙鲆高产杂交品种的培育方法。主要包括抗感染杂交亲本的筛选和快速生长杂交亲本的筛选、不同国家来源牙鲆的杂交、杂交苗种生长性能和抗感染能力的测定等。该方法具有针对性强、效率高、效果明显以及易于操作等特点，杂交牙鲆鱼苗的生长速率较普通牙鲆鱼苗提高了30％左右，成活率比普通牙鲆鱼苗提高了30％以上。该技术为海水鱼类高产抗感染品种培育开辟了新的技术途径，是一种能在鱼类良种培育中应用的高产优良品种培育方法，适宜在养殖鱼类上推广应用，对提高鱼类养殖产量具有重要意义和应用价值。

主权项

一种牙鲆优良品种的杂交育种方法，其特征在于它的内容包括四个方面：(1)、杂交亲本的筛选；(2)、杂交；(3)、杂交苗种生长性能评定；(4)、杂交苗种抗感染能力测定；(1)、杂交亲本的筛选：包括：A、抗感染杂交亲本的筛选，B、快速生长杂交亲本的筛选：A、抗感染杂交亲本的筛选，如下2种方法可用其中一种进行抗感染亲本的筛选：a.自然选择抗感染亲本：在每年夏季高温季节，调查牙鲆养殖场的鱼苗患病和存活情况，选择病害发生严重的池塘，收集池塘中因为水温高导致病原菌感染发病后存活下来的鱼苗，一般选择70-80％以上的鱼苗死亡、而只有约20-30％的鱼苗存活下来的鱼苗；将这些鱼苗培育成亲鱼，达到性成熟，作为杂交的牙鲆抗感染群体；抗感染群体的养殖和繁殖按照常规方法进行：b、通过病原菌感染选择抗感染亲本：采用人工培养的病原菌弧菌感染牙鲆鱼苗或鱼种，病原弧菌的培养按常规方法进行；感染采用鱼体浸泡法进行，将病原菌培养物稀释成75、150、300、600和1200倍等不同浓度，然后将750-1500尾鱼苗浸泡在含有不同浓度病原菌的海水中，感染3-8小时后，将鱼苗转到新鲜海水中养殖观察；感染10-30天后计算不同浓度组鱼苗的存活率，收集存活率达20-30％的感染组中的存活鱼苗，培育为亲鱼，用作杂交的抗感染亲本；B、快速生长杂交亲本的筛选：收集来自中国黄海和韩国、日本国的牙鲆鱼苗，选择不同来源鱼苗中规格比较整齐、体质健壮的鱼苗进行培育和筛选，当鱼苗生长至9-12厘米时，从5000-10000尾鱼苗中按1％选出个体大的50-100尾鱼苗进行养殖，将这些鱼苗培育成熟，作为杂交的快速生长亲本；(2)、杂交：利用获得的抗感染亲本和/或快速生长杂交亲本，通过中国牙鲆-韩国牙鲆、中国牙鲆-日本牙鲆和韩国牙鲆-日本牙鲆等不同交配方式进行杂交；将中国牙鲆抗感染群体的雄鱼或雌鱼分别与不同国家的有快速生长能力的雌鱼或雄鱼进行配对繁殖建立杂交组合，或将韩国牙鲆与日本牙鲆交配建立杂交组合；在杂交鱼苗临近孵化出膜时，将其转移到育苗缸中进行苗种培育，每缸培育一个组合；每立方米水体培育3000-5000尾仔鱼；(3)、杂交苗种生长性能的评定：当杂种鱼苗生长至9-12厘米时，随机取200-300尾鱼，每个杂交组合采样40-60尾鱼苗测量体长和体重，作为放养时的体长和体重，将不同杂交组合放在规格相同的水泥池进行分池养殖，或者对不同组合进行标记后放在同一水泥池中进行养殖；在养殖8-15个月后收集各杂交组合鱼苗进行体长和体重测量，每个组合的鱼苗全部测完或采样40-60尾鱼苗进行测量，计算各个组合体长、体重的平均数，利用日增重率，即养殖期间增加的重量/实际养殖时间，评价不同杂交组合的生长性能；日增重率越高，生长速度越快，将生长快速的杂交组合选择出来作为高产杂交优良品种进行养殖和推广；(4)、杂交苗种抗感染能力测定：通过病原菌胁迫测定杂交苗种的抗感染能力：当杂交组合鱼苗培育到9-12厘米时，从各组合中选取100-150尾鱼苗放在含有鳗弧菌的海水中进行胁迫，将培养好的病原弧菌菌液用生理盐水稀释成浓度为15-20OD的菌液，将上述菌液用120-240倍的海水稀释，将50-75尾不同杂交组合鱼苗放在上述含菌液的海水中浸泡3-8小时，然后将鱼苗转到新鲜海水中培育，在感染后10-20天内计算各杂交组合鱼苗的存活率，根据存活率高低确定各杂交组合鱼苗的抗感染能力；将存活率在60％以上的组合定为抗感染能力强的杂交组合，在25-59％之间的组合定为抗感染能力中等杂交组合，在24％以下的组合确定为抗感染能力差的组合；将抗感染能力强、生长速度又快的杂交组合选择出来，作为高产抗感染杂交优良品种进行养殖和推广。