[发明专利]单核细胞增生李斯特菌荧光定量PCR检测试剂盒及检测方法

摘要

一种食品安全技术领域的增生李斯特菌荧光定量PCR检测试剂盒及检测方法，其中的试剂盒包括：荧光定量PCR反应液、荧光探针、热启动TaqDNA聚合酶、标准阳性模板和阴性质控标准品；本发明通过采用常规方法提取待测样品DNA，并以所得DNA为模板，利用单核细胞增生李斯特菌荧光定量PCR检测试剂盒进行PCR扩增，得反应产物，之后将反应产物置于定量PCR仪中进行荧光检测，对样品中单核细胞增生李斯特菌进行定性检测或定量检测。本发明的试剂盒可用于单核细胞增生李斯特菌的定性和定量检测；本发明的试剂盒检测特异性高，检测灵敏度高，定量准确，检测速度快。

主权项

一种单核细胞增生李斯特菌荧光定量PCR检测试剂盒，包括：荧光定量PCR反应液、荧光探针、热启动TaqDNA聚合酶、标准阳性模板和阴性质控标准品，其特征在于：所述的荧光定量PCR反应液具体为：10×PCR buffer、Mg2+、dNTPs、正向引物、反向引物；其中正向引物的碱基序列如SEQ ID No.1所示，反向引物的碱基序列如SEQ ID No.2所示；所述的荧光探针的碱基序列如SEQ ID NO：3所示，其中，荧光报告基团为FAM，荧光淬灭基团为ELIPCE；所述的标准阳性模板为重组质粒的DNA，该重组质粒的质粒为pMD18-T，整合的基因的碱基序列如SEQ ID No.4所示；所述的阴性质控标准品为沙门氏菌、副溶血弧菌或金黄色葡萄球菌DNA。