[发明专利]马铃薯离体培养一步成苗培养基及其优化方法及成苗方法

摘要

本发明公开了一种优化马铃薯离体培养一步成苗培养基的方法，该培养基使马铃薯试管苗叶片离体培养一步成苗，所述一步成苗培养基以MS培养基为基础培养基，并在1L MS培养基中，补加不同浓度和组合的6-苄氨基嘌呤，萘乙酸和2，4-二氯苯氧乙酸，而后经愈伤组织诱导直接分化不定芽和不定根，一步获得马铃薯再生植株。本发明无需将初代培养基中诱导获得的愈伤组织转接于分化培养基中再生成苗，与离体培养多步再生成苗相比，其步骤简化，培养周期短，重复性好，成苗率高。

主权项

一种优化马铃薯离体培养一步成苗培养基的方法，该培养基使马铃薯试管苗叶片离体培养一步成苗，其特征在于，包括以下步骤：(1)以不加任何激素的MS培养基作为对照，采用三因素三水平的L9(34)正交试验设计，在MS培养基中，添加不同浓度的6-苄氨基嘌呤、萘乙酸和2，4-二氯苯氧乙酸的不同组合，配制成马铃薯离体培养一步成苗培养基，其中6-苄氨基嘌呤浓度为：1.5mg/L、2.0mg/L和2.5mg/L，萘乙酸浓度为：0.1mg/L、0.2mg/L和0.4mg/L，2，4-二氯苯氧乙酸浓度为：0.0mg/L、0.1mg/L和0.2mg/L；将所得的不同激素组合的培养基置于培养瓶中；(2)将马铃薯试管苗叶片接种在步骤(1)所述不同激素组合的培养基中；(3)将步骤(2)所得的接种后培养基置于温度为22±2℃条件下，全黑暗培养7～10天后进行16h/d光照培养，光强为2000lx；(4)光照培养20d后，统计愈伤组织诱导率及愈伤组织的形成情况，光照培养40d后统计愈伤组织分化率及成苗状况；(5)分析步骤(4)所得的实验数据，以愈伤组织诱导率高及愈伤组织的形成情况良好，愈伤组织分化率高及成苗状况良好所对应的培养基为优化的培养基。