[发明专利]选择和扩增多核苷酸的方法有效
| 申请号: | 200980162143.X | 申请日: | 2009-08-25 |
| 公开(公告)号: | CN102597256A | 公开(公告)日: | 2012-07-18 |
| 发明(设计)人: | 安德里亚·萨博;罗伯托·里加蒂;敏-瑞·理查德·沈 | 申请(专利权)人: | 伊鲁米那股份有限公司 |
| 主分类号: | C12P19/34 | 分类号: | C12P19/34 |
| 代理公司: | 北京安信方达知识产权代理有限公司 11262 | 代理人: | 武晶晶;郑霞 |
| 地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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| 摘要: | 本发明提供了控制固相载体表面不同分子种类的密度的方法。不同分子种类的第一混合物在一定条件下附着到固相载体上,所述条件允许各分子种类以所需的密度附着,从而产生具有附着的捕获分子的衍生载体。用不同分子种类的第二混合物处理衍生载体,其中第二混合物中的不同分子种类与固相载体上附着的不同捕获分子特异性结合。一个或多个捕获分子可以被可逆地修饰,使得捕获分子在附着了分子种类的第二混合物之前和之后具有不同的活性。在特定实施方案中,不同的分子种类是核酸,其被可逆地修饰,以在扩增反应中具有不同的活性。 | ||
| 搜索关键词: | 选择 扩增 多核苷酸 方法 | ||
【主权项】:
在固相载体上选择和扩增多核苷酸的方法,该方法包括:(a)提供包含多个模板多核苷酸的核酸样本;(b)提供固定在固相载体上的多个寡核苷酸,其中所述多个寡核苷酸包含:(i)多个捕获寡核苷酸,各捕获寡核苷酸包含能够与所述核酸样本的选定区域杂交的不同序列,和(ii)多个扩增寡核苷酸,其中所述捕获寡核苷酸以比所述扩增寡核苷酸低的密度被固定;(c)在使得所述模板多核苷酸选择性地与所述捕获寡核苷酸杂交的条件下,将所述模板多核苷酸施加至所述固相载体;(d)延伸所述捕获寡核苷酸,以生成与所述模板多核苷酸互补的延伸产物;和(e)扩增所述延伸产物,其中所述扩增包括将一个或多个所述固定的扩增寡核苷酸与一个或多个所述延伸产物退火。
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