[发明专利]一种西兰花体细胞胚诱导植株再生的方法

摘要

一种西兰花体细胞胚诱导植株再生的方法，它涉及一种体细胞胚诱导植株再生的方法。本发明解决了现有西兰花通过器官发生进行离体再生的方法存在的诱导分化时间长、繁殖率低以及不同品种间分化率差异大的问题。方法：1.西兰花种子消毒；2.西兰花种子培养得到幼苗；3.将外植体切成小段，然后诱导培养，得到成熟体细胞胚；4.将成熟体细胞胚接种到1/2MS固体培养基或者再生培养基中培养，即完成了西兰花体细胞胚诱导植株再生。本发明的方法诱导分化时间短、诱导率高、不同品种间分化率差异小。

主权项

1.一种西兰花体细胞胚诱导植株再生的方法，其特征在于西兰花体细胞胚诱导植株再生的方法通过以下步骤进行的：一、先用质量浓度为65％～75％的酒精对西兰花种子消毒50～70s，再用质量浓度为0.8％～1.2％的次氯酸溶液消毒10～16min，然后用无菌水冲洗3～5次；二、将消毒后的西兰花种子接种于萌发培养基中培养6～8天，培养温度为20～25℃，即得到西兰花幼苗；三、用刀将西兰花幼苗中的子叶、下胚轴或根切成0.5～10mm的小段后接种到固体诱导培养基或液体诱导培养基中培养，培养温度为20～25℃，在无光照条件下培养7～10天得到球形胚，然后将球形胚从母体上分离出来再接种到液体诱导培养基中，在温度为20～25℃的条件下培养14～20天得到成熟体细胞胚；四、将成熟体细胞胚接种到1/2MS固体培养基或者再生培养基中培养，培养温度为20～25℃，培养时间为28～30天，即完成了西兰花体细胞胚诱导植株再生；其中，步骤二中的萌发培养基是以MS培养基为基本培养基，且每1L的萌发培养基中还包含18～22g的蔗糖和7～9g的琼脂，pH值为5.6～6.0；步骤三中的固体诱导培养基是MS培养基为基本培养基，且每1L的诱导培养基还包含0.2～1.2mg的2，4-二氯苯氧乙酸、18～22mg的蔗糖和7～9g的琼脂，pH值为5.6～6.0；步骤三中的液体诱导培养基均是以MS培养基为基本培养基，且每1L的诱导培养基还包含0.2～1.2mg的2，4-二氯苯氧乙酸和18～22mg的蔗糖，pH值为5.6～6.0；步骤四中的再生培养基是以1/2MS固体培养基为基本培养基的改良培养基，且每1L的改良培养基中还包含0.8～1.2mg的苄基氨基嘌呤或0.8～1.2mg的赤霉素，pH值为5.6～6.0。