[发明专利]一种组织工程微囊化肝细胞及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种属于动物细胞组织工程领域的组织工程微囊化肝细胞及其制备方法。该制备方法是将肝细胞和血管内皮细胞以1∶0.5-1的数量比置于质量百分比浓度为1.5-2％的海藻酸钠水溶液中混合，制成细胞悬液，然后采用高压静电微囊发生仪制作海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊肝细胞，本发明还公开了组织工程微囊化肝细胞在制备肝衰竭药物方面的应用，制得的微囊化细胞具有体积小，生物相容性高、通透性好的特点，适合作为细胞移植的载体；可以在宿主体内长期的发挥作用，避免了反复使用化学药物所带来了的副作用；此微囊化肝细胞的制备过程简便，适合大批量的生产。

主权项

一种组织工程微囊化肝细胞的制备方法，其特征在于，按照如下操作步骤进行：(1)将肝细胞和血管内皮细胞以1∶0.5-1的数量比置于质量百分比浓度为1.5-2％的海藻酸钠水溶液中混合，制成细胞悬液，使每毫升细胞悬液中含有的总细胞数为3-5×106个；(2)利用高压静电微囊发生仪将步骤(1)获得的细胞悬液喷射到100-120mM的氯化钙水溶液中，反应12-20min，形成海藻酸钙胶珠；(3)将上述海藻酸钙胶珠洗涤后加入到质量百分比浓度为0.02-0.07％的多聚赖氨酸水溶液中，反应5-10min，自由沉降后，收集沉淀物；(4)清洗步骤(3)获得的沉淀物后将其加入到质量百分比浓度为0.02-0.07％的海藻酸钠水溶液中，反应3-8min，自由沉降后，收集沉淀物；(5)清洗步骤(4)获得的沉淀物后将其加入到浓度为45-70mM的柠檬酸钠水溶液中，反应3-8min，收集沉降物并清洗，从而获得组织工程海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊化肝细胞。