[发明专利]水体环境中铜绿微囊藻噬藻体的巢式PCR检测方法无效
| 申请号： | 200910095185.8 | 申请日： | 2009-11-12 |
| 公开（公告）号： | CN101935690A | 公开（公告）日： | 2011-01-05 |
| 发明（设计）人： | 刘丽;向安;冯悦;夏雪山;魏大巧 | 申请（专利权）人： | 昆明理工大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 昆明今威专利代理有限公司 53115 | 代理人： | 赛晓刚 |
| 地址： | 650093 云南省昆明*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明属于分子生物学领域，涉及利用分子生物学技术对水体环境中铜绿微囊藻病毒(噬藻体)进行检测和评价的方法。本发明以自行设计的内外两条引物，建立了待检水体中铜绿微囊藻噬藻体的巢式PCR检测方法。该方法包括：基于铜绿微囊藻噬藻体Ma-LMM01的g91基因片段，利用Primer Express2.0软件设计合理的巢式PCR引物；对待检水样浓缩液中提取的噬藻体DNA基因片段进行巢式PCR扩增；PCR产物的纯化和测序；利用NCBI中的Blast软件进行多重序列比对分析，最后利用该检测体系对待检测水样中铜绿微囊藻噬藻体进行检测。通过该法已检测到滇池水样中一条与Ma-LMM01噬藻体有高达98％同源相关性的核苷酸序列。 | ||
| 搜索关键词： | 水体 环境 铜绿 微囊藻噬藻体 pcr 检测 方法 | ||
【主权项】：
水体环境中铜绿微囊藻噬藻体的巢式PCR检测方法，包括基于铜绿微囊藻噬藻体Ma‑LMM01的g91基因片段，设计巢式PCR引物；提取待检水样浓缩液中噬藻体DNA基因片段；利用引物对该基因片段进行巢式PCR外围引物和内围引物扩增；PCR产物的纯化和测序；进行多重序列比对分析。
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