[发明专利]香雪兰UDP-葡萄糖类黄酮-3-0-葡萄糖基转移酶的cDNA无效

专利信息
申请号: 200910067364.0 申请日: 2009-07-29
公开(公告)号: CN101659956A 公开(公告)日: 2010-03-03
发明(设计)人: 王丽;付杨;隋昕 申请(专利权)人: 东北师范大学
主分类号: C12N15/54 分类号: C12N15/54
代理公司: 长春市东师专利事务所 代理人: 刘延军;李荣武
地址: 130024吉*** 国省代码: 吉林;22
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摘要: 发明属于植物分子生物学领域,具体涉及从红花香雪兰花瓣中分离编码UDP-葡萄糖类黄酮-3-O-葡糖基转移酶(UF3GT)的cDNA。香雪兰UF3GT基因(FhGT1)cDNA的核苷酸序列分析显示:克隆得到的FhGT1基因长1383bp,开放阅读框架长1338bp,其编码的蛋白序列长446个氨基酸,推测蛋白质的分子量是48,043Da,等电点为5.71。利用所述的FhGT1基因在大肠杆菌细胞中表达重组的UF3GT蛋白,该蛋白在体外酶活反应试验中,能促使花色素与UDP-葡萄糖反应,催化生成花色苷。其在转基因植物花卉的花色修饰方面具有应用价值。
搜索关键词: 香雪兰 udp 葡萄糖 类黄酮 葡萄 糖基转移酶 cdna
【主权项】:
1、香雪兰UDP-葡萄糖类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶的cDNA,其特征如下:其中1:FhGT1基因5’端的核苷酸序列为TCATACTCTTGTTTCTTGCTTGTATTTGATTGATCATCAGCAACAGCAAGCAATGGGATCGGCCGATCGCTCCCACGTGGCACTCCTGGCCTTCCCCTTCGGGACCCACGCCGCCCCTCTCCTCTCCCTCGGCCTCAACCTCGCCTCCTCGGCACCCCACGGCACCACTTTCTCCTTTCTTAGCAACCGCCGTCCCGTCTCCTTGCCACCCAATTCCGCCATCAAGTTCTACGAGATCGCGGACGGCTCCGACCCCGAACACGAGGGACACGTGCACCCCGAAGAGGAGGTGAGGGTGTTCATGGAGGAGACGCCCGGGAACTACAAGAAGGCGCTGGAGGCCGCGGTTGATAGGTGCGGGGGGCAGCGTGTCACGTGCATCGTGGCGGACGCGTTCCTCTGGTTCGTTGGGGACATCGCGGCGGAGTTCGGTGTCCATTGGGTCCCACTCTGGACTGGCGGGCCGTGCAGCTTCCTCGCCCACCTCTACACCGACATGCTGAGGAACAAGATAGGTACAGGGAAGGAAGCTGATCCAGATGAGGACCTCCAATTCCTCCCTGGACTTTCCGGTTTCCGTGTACGCGACCTCCCCGACGACATTGTCACCGGAGACCTCACCGGTGCCTTCGCCAGTCTCCTCCACCGCATGTCAATCGAGATTCCCCGCTCCGCTGCCGCCATTGCCATCAACACCTTCGAGGGCCTCCATCCGGACATCGACGCCGACCTCGCCTCCAAGTTCAAGAAGTCACTCCCAATTGGCCCACTCAACCTCCTCAATCCCACCCTGAACCAACCGGACAAGTTCTCTTGCCTAGCCTGGCTGGACAAGTTCGAACCGCATTCGGTCGCCTACGTCAGTTTCGGCACTCTAGCAGCCCTCACCGAAGCCGAGCTCGTCGAGCTGGCATCCGGCFhGT1基因5’端核苷酸序列长为919bp;其中2:RACE法获得FhGT1基因的3’端序列为AATCCCACCCTGAACCAACCGGACAGGTTCTCTTGCCTAGCCTGGCTGGACAAGTTCGAACCGCATTCGGTCGCCTACGTCAGTTTCGGCACTCTAGCAGCCCTCACCGAAGCCGAGCTCGTCGAGCTGGCATCCGGCCTCGAGCAGAGTGGGGTCCCTTTCCTCTGGTCCCTCAAGGAACCGGGCCAACTGCCGGCCGGGTTCCTGGACCGGACCAAGGACCGGGGTCTCGTGGTCCCGTGGGTGCCGCAAGCCGAAGCATTGAAACATGTTGCGGTGGGCGCATCCTTGAGCCACTGCGGATGGAACTCCGTCATGGAGAGCGTAACGAGCGGCGTGCCGATGCTCTGCAGGCCGTTCCTCGGGGACCAGACAATGAATGCACGTGCCGTGTCGCATGTTTGGAAAGTCGGGGTGACGTTCGAGAATGGCACGATGACTAGGGCCAACGTGGCGGAGGCCATGAAGAAGGTGGTTGTCGGCGAAGAAGGGAGGAAGATGAGGGAGAGAGCGGCGGCGATTCGGGAAATGGCGGCCGGCTCGGTGCGACCGGGCGGAAGCTCGGTGCAAAACTTCAAGGCTCTCCTAGACATTGTAATTGCACGTTGAGGTTCAGCTAGTGTTCGGAATATGACTGAAGTCTGATTGTATTTGAGTGAGATGGAGTATTAGTATTGTGCCTATTAATTCCTTGTTATGTTTGAAGAAATGAATCTAGTAATAATATAATAAACTTCTTGCATTTCGTCCTCTCTTGCTTATTGTGAAAGAGAGACCTGCAAATTCTTCTTGAGAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAATCGATGTCGACTCGAGTCFhGT1基因3’端核苷酸序列长为833bp;其中3:FhGT1基因的全长核苷酸序列为CAGCAAGCAATGGGATCGGCCGATCGCTCCCACGTGGCACTCCTGGCCTTCCCCTTCGGGACCCACGCCGCCCCTCTCCTCTCCCTCGGCCTCAACCTCGCCTCCTCGGCACCCCACGGCACCACTTTCTCCTTTCTTAGCAACCGCCGTCCCGTCTCCTTGCCACCCAATTCCGCCATCAAGTTCTACGAGATCGCGGACGGCTCCGACCCCGAACACGAGGGACACGTGCACCCCGAAGAGGAGGTGAGGGTGTTCATGGAGGAGACTCCCGGGAACTACAAGAAGGCGCTGGAGGCCGCGGTTGATAGGTGCGGGGGGCGGCGTGTCACGTGCATCGTGGCGGACGCGTTCCTCTGGTTCGTTGGGGACATCGCGGCGGAGTTCGGTGTCCATTGGGTCCCACTCTGGACTGGCGGGCCGTGCAGCTTCCTCGCCCACCTCTACACCGACATGCTGAGGAACAAGATAGGTACAGGGAAGGAAGCTGATCCAGATGAGGACCTCCAATTCCTCCCTGGACTTTCCGGTTTCCGTGTACGCGACCTCCCCGACGACATTGTCACCGGAGACCTCACCGGTGCCTTCGCCAGTCTCCTCCACCGCGTGTCAATCGAGATTCCCCGCTCCGCTGCCGCCATTGCCATCAACACCTTCGAGGGCCTCCATCCGGACATCGACGCCGACCTCGCCTCCAAGTTCAAGAAGTCACTCCCAATTGGCCCACTCAACCTCCTCAATCCCACCCTGAACCAACCGGACAAGTCCTCTTGCCTAGCCTGGCTGGACAAGTTCGAACCGCATTCGGTCGCCTACGTCAGTTTCGGCACTCTAGCAGCCCTCACCGAAGCCGAGCTCGTCGAGCTGGCATCCGGCCTCGAGCAGAGTGGGGTCCCTTTCCTCTGGTCCCTCAAGGAACCGGGCCAACTGCCGGCCGGGTTCCTGGACCGGACCAAGGACCGGGGTCTCGTGGTCCCGTGGGTGCCGCAAGCCGAAGCATTGAAACATGTTGCGGTGGGCGCATTCTTGAGCCACTGCGGATGGAACTCTGTCATGGGGAGCGTAACGAGCGGTGTGCCGATGCTCTGCAGGCCGTTCCTCGGGGACCAGACGATGAATGCACGTGCCGTGTCGCATGTTTGGAAAGTCGGGGTGACGTTCGAGAATGGCACGATGACTAGGGCCAACGTGGCGGAGGCCATGAAGAAGGTGGTTGTCGGCGAAGAAGGGAGGAAGATGAGGGAGAGAGCGGCGGCGATTCGGGAAATGGCGGCCGGCTCGGTGCGACCGGGCGGAAGCTCGGTGCAAAACTTCAAGGCTCTCCTAGACATTGTAATTGCACGTTGAGGTTCAGCTAGTGTTCGGAATATGACTGAAGTCTGA克隆得到FhGT1基因全长为1383bp,开放阅读框架长1338bp,下划线表示的是该序列的起始密码子和终止密码子;其中4:由FhGT1基因核苷酸序列推测得到的蛋白质序列为MGSADRSHVALLAFPFGTHAAPLLSLGLNLASSAPHGTTFSFLSNRRPVSLPPNSAIKFYEIADGSDPEHEGHVHPEEEVRVFMEETPGNYKKALEAAVDRCGGQRVTCIVADAFLWFVGDIAAEFGVHWVPLWTGGPCSFLAHLYTDMLRNKIGTGKEADPDEDLQFLPGLSGFRVRDLPDDIVTGDLTGAFASLLHRMSIEIPRSAAAIAINTFEGLHPDIDADLASKFKKSLPIGPLNLLNPTLNQPDRFSCLAWLDKFEPHSVAYVSFGTLAALTEAELVELASGLEQSGVPFLWSLKEPGQLPAGFLDRTKDRGLVVPWVPQAEALKHVAVGASLSHCGWNSVMESVTSGVPMLCRPFLGDQTMNARAVSHVWKVGVTFENGTMTRANVAEAMKKVVVGEEGRKMRERAAAIREMAAGSVRPGGSSVQNFKALLDIVIAR-FhGT1基因编码的蛋白序列长446个氨基酸,蛋白质的分子量推测是48,043Da,等电点为5.71。
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