[发明专利]一种组织培养快繁细叶小羽藓配子体的方法

摘要

本发明公开了一种组织培养快繁细叶小羽藓配子体的方法，所述方法包括以下顺序步骤：切取细叶小羽藓配子体新生羽状分枝先端，进行表面灭菌后接种到改良Knop′s培养基上，进行培养10天，以筛选获得无菌外植体；将得到的无菌外植体转接到诱导新生配子体产生的培养基上，进行培养50天；将诱导培养得到的新生配子体切割剪碎，接种到配子体增殖扩繁的培养基上，进行培养50天即可。本发明首次建立了组织培养快繁细叶小羽藓配子体的方法，填补了现有技术的空白。本发明方法极利于高度集约化和高密度工产化生产，可为研究苔藓植物对大气重金属污染的生理响应和重金属元素在苔藓植物体内的迁移、分布和富集机制提供便捷。

主权项

1.一种组织培养快繁细叶小羽藓配子体的方法，其特征在于，所述方法包括以下顺序步骤：a)切取细叶小羽藓配子体新生羽状分枝先端，进行表面灭菌，然后接种到改良Knop′s培养基上，进行培养10天，培养条件为：温度25±2℃，光照强度2000lx，光照时间10小时/天；所述改良Knop′s培养基配方为：改良Knop′s基本培养基+0～10g/l蔗糖；b)将步骤a)得到的无菌外植体转接到诱导新生配子体产生的培养基上，进行培养50天，培养条件为：温度(20～35)±2℃，光照强度3000lx，光照时间12小时/天；所述诱导新生配子体产生的培养基配方为：改良Knop′s基本培养基+0.1～2.0mg/l 6-苄氨基嘌呤+0.01～0.2mg/l萘乙酸+10g/l蔗糖；c)将步骤b)诱导培养得到的新生配子体切割剪碎，接种到配子体增殖扩繁的培养基上，进行培养50天，培养条件为：温度(20～35)±2℃，光照强度3000lx，光照时间12小时/天；所述配子体增殖扩繁的培养基配方为：改良Knop′s基本培养基+0～0.5mg/l 6-苄氨基嘌呤+0.05mg/l萘乙酸+10g/l蔗糖；所述改良Knop′s基本培养基的配方为：KNO3 250mg/l、MgSO4·7H2O250mg/l、KH2PO4 250mg/l、Ca(NO3)2·4H2O 1000mg/l、酒石酸氨0.115mg/l、NaFe-EDTA 36.7mg/l、MnSO4·4H2O 11.15mg/l、H3BO3 3.1mg/l、KI0.415mg/l、ZnSO4·7H2O 4.3mg/l、CuSO4·5H2O 0.0125mg/l、NaMoO4·2H2O 0.125mg/l、CoCl2·6H2O 0.0125mg/l。