[发明专利]一种检测异基因造血干细胞移植后供受嵌合率的方法无效
申请号: | 200910052260.2 | 申请日: | 2009-05-31 |
公开(公告)号: | CN101575643A | 公开(公告)日: | 2009-11-11 |
发明(设计)人: | 王健民;邵宇 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第二军医大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 上海翼胜专利商标事务所(普通合伙) | 代理人: | 翟 羽 |
地址: | 200433*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明采用了实时定量PCR技术(RQ-PCR)联合单核苷酸多态性(SNP)检测异基因造血干细胞移植后供受者嵌合率,建立了含有目的基因和内参的质粒标准品倍比稀释的标准曲线,标准品构建模板为此SNP位点阳性的患者的定性PCR产物,将其克隆入T载体、构建质粒,倍比稀释后建立标准曲线。本发明提供的新方法利于及早发现排斥、预防复发,提高移植的成功率,具有较高的灵敏度和稳定性,不需要大量消耗移植前的宝贵标本,且可以作为个体识别的用途。本发明可替代目前通行的STP-PCR半定量检测方法,利用大多医院已购置的实时定量PCR仪进行嵌合率定量检测,准确、简便、快速、成本较低。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 基因 造血 干细胞 移植 后供受 嵌合 方法 | ||
【主权项】:
1、一种检测异基因造血干细胞移植后供受者嵌合率的方法,该方法包括以下步骤:(1)基因组DNA制备;(2)SNP位点选择及引物和探针设计;(3)筛选供受者差异SNP位点;(4)质粒标准品及标准曲线的建立;(5)实时定量PCR检测;(6)供者嵌合率的计算。
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