[发明专利]可用于SQUID检测的水溶性磁性纳米粒子的制备方法

摘要

本发明公开了一种SQUID检测水溶性磁性纳米粒子的制备新方法。其特征在于通过在非磁性基片表面(如多孔板，凝胶玻片或膜片，微阵列玻片或膜片)修饰和有序组装O157抗原的抗体(或目标DNA)，利用生物识别结合二次捕获生物修饰后的超顺磁磁性纳米颗粒，实现了SQUID检测。没有与磁性纳米粒子结合的抗体(或目标DNA)基片检测不到磁信号(如图5曲线②所示)；而结合抗体(或目标DNA)的基片会产生一个缓慢衰减的磁信号(如图5曲线①所示)，通过SQUID采集磁信号即可分析出待检测物质量。因其衰减时间与有效结合抗原的抗体(或目标DNA)的超顺磁磁性纳米颗粒浓度相关。即可对磁性纳米粒子定量，此方法灵敏、准确，是一种操作简单、快速的新型检测方法。

主权项

1、一种SQUID检测水溶性磁性纳米粒子的制备新方法，包括下述步骤：(a)以共沉淀法制备超顺磁性金包覆的Fe3O4。采用三价铁离子和二价铁离子的混合溶液，在碱(NaOH)的作用下，通过共沉淀法制得超顺磁Fe3O4纳米粒子；随后在氨基硅烷的作用下，将所得磁性粒子氨基化；再在金离子(Au3+)存在的条件下，利用超声化学法合成金包覆的Fe3O4纳米粒子。(b)利用巯基乙胺使得金磁粒(Fe3O4)表面修饰上巯基，在其表面形成巯基键(-SH)；然后，在戊二醛的作用下，使得金磁粒表面修饰上醛基，因为醛基易于吸附键合单抗且和生物分子具有很好的相容性。再对其进行生物素-亲和素修饰。(c)将上述磁粒进行单抗化后，对大肠杆菌进行特异性吸附，捕获抗原后再与经修饰有抗体的微小基片有序组装，使得基片上的磁性纳米粒子组装放大磁信号；即可得到SQUID检测体系A。(d)或将生物素-亲和素修饰的磁粒，进行DNA连接，再与修饰有目标DNA的基片识别进行有序组装，即可得到SQUID检测体系B。