[发明专利]人鼻咽组织特异性基因C10RF102编码蛋白的制备及其多抗、单抗的制备无效
| 申请号: | 200910042833.3 | 申请日: | 2009-03-11 |
| 公开(公告)号: | CN101503701A | 公开(公告)日: | 2009-08-12 |
| 发明(设计)人: | 李桂源;向波;王理;李夏雨;谭怡忻;李小玲;张文玲;易梅;刘玮 | 申请(专利权)人: | 中南大学 |
| 主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12P21/02;C07K16/18;C12P21/08;C12R1/19 |
| 代理公司: | 长沙市融智专利事务所 | 代理人: | 颜 勇 |
| 地址: | 410083湖*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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| 摘要: | 人鼻咽组织特异性基因C10RF102编码蛋白及其抗体的制备。本发明采用多聚酶链式反应克隆C10RF102基因蛋白编码序列,构建该基因的融合表达质粒,导入RosettaBlue(DE3)大肠杆菌中,诱导并纯化C10RF102蛋白,并制备出单抗和多抗。C10RF102基因编码产物在人鼻咽组织特异性表达且在鼻咽癌中表达下调,C10RF102基因编码产物及其抗体的制备将为鼻咽癌的基因诊断和治疗提供新的手段,能够实现鼻咽癌的早诊断、早发现和早治疗。 | ||
| 搜索关键词: | 鼻咽 组织 特异性 基因 c10rf102 编码 蛋白 制备 及其 多抗 | ||
【主权项】:
1、人鼻咽组织特异性基因C10RF102编码蛋白的制备方法,其特征在于,所述的制备方法的具体步骤为:根据C10RF102基因序列设计特异性引物,C10RF102-forward:5’-ATACATATGTCGGTGCGCACGTTACCG-3’,C10RF102-reverse:5’-CTCGAGCTATAACTCATCCATCAT-3’,以人胎脑cDNA文库质粒为模板,PCR扩增出C10RF102基因编码区;用Nde I和Xho I酶切PCR扩增出的C10RF102基因编码区和pET28b载体,再将回收的5.3kb长的pET28b载体片段和C10RF102基因编码区连接,构建成含融合基因的pET28b-C10RF102载体,将含融合基因的pET28b-C10RF102载体转入大肠杆菌RosettaBlue(DE3)中,再将转化的大肠杆菌经抗生素筛选、诱导表达、破碎分离纯化即得人鼻咽组织特异性基因C10RF102编码蛋白。
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