[发明专利]一种检测水源水遗传毒性物质的简易方法有效
| 申请号: | 200910041518.9 | 申请日: | 2009-07-29 |
| 公开(公告)号: | CN101619342A | 公开(公告)日: | 2010-01-06 |
| 发明(设计)人: | 孙国萍;张国霞;郭俊;曾国驱;许玫英;张家强 | 申请(专利权)人: | 广东省微生物研究所 |
| 主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02;G01N21/31 |
| 代理公司: | 广州科粤专利代理有限责任公司 | 代理人: | 余炳和 |
| 地址: | 510070广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | 本发明公开了一种检测水源水遗传毒性物质的简易方法,包括以下步骤:将菌株TA1535接种到液体LB或者营养肉汤培养基里,振荡培养,用无菌水调整菌悬液浓度至OD595为0.2-0.3,得菌悬液;取至少四个浓度梯度的水样样品浓缩物,分别加入到所述的菌悬液中,振荡培养,以DMSO为溶剂对照,以4-NQO为阳性对照;振荡培养后加入B-Buffer混匀,再加氯仿振荡混匀;加入ONPG溶液,温育显色30-50min;加入Na2CO3溶液终止显色,测定显色后溶液的OD420和OD550;算样品和溶剂对照的酶活性,并计算诱导率IR。本发明检测水源水中遗传毒性物质的简易方法,可以在保持试验操作常规化,测试结果精确、灵敏的前提下,省略很多步骤,节省大量时间。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 检测 水源 遗传 毒性 物质 简易 方法 | ||
【主权项】:
1、一种检测水源水遗传毒性物质的简易方法,其特征在于,包括以下步骤:1)将菌株TA1535接种到液体LB或者营养肉汤培养基里,振荡培养过夜得到菌悬液,用无菌水调整菌悬液浓度至OD595为0.2-0.3;2)取至少四个浓度梯度的水样样品浓缩物各100μl,分别加入到550-650μl步骤1)所述的菌悬液中,35±2℃振荡培养2-3h,以DMSO为溶剂对照,以4-NQO为阳性对照;3)振荡培养后加入2.5-3.0ml B-Buffer混匀,再加入5-10μl氯仿振荡混匀;加入500-800μlONPG溶液,35±2℃温育显色30-50min;4)加入300-500μl Na2CO3溶液终止显色,测定显色后溶液的OD420和OD550;5)计算样品和溶剂对照的酶活性,并计算诱导率IR,若IR≥2.0,且具有剂量反应关系时,表明水样样品含有遗传毒性物质。
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