[发明专利]BmNPV－家蚕幼虫多基因表达系统构建方法无效
| 申请号： | 200810140645.X | 申请日： | 2008-07-16 |
| 公开（公告）号： | CN101372697A | 公开（公告）日： | 2009-02-25 |
| 发明（设计）人： | 姚伦广;张二辉;孙京臣;阚云超;刘宗才;刘飞 | 申请（专利权）人： | 南阳师范学院 |
| 主分类号： | C12N15/866 | 分类号： | C12N15/866 |
| 代理公司： | 郑州红元帅专利代理事务所（普通合伙） | 代理人： | 徐皂兰 |
| 地址： | 473061河南省南*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种BmNPV－家蚕幼虫多基因表达系统构建方法，按下列步骤顺序完成：(1)将阿拉伯糖启动子(pBAD)控制的I－SceI表达盒重组到E.coli DH10B的基因组中获得新的受体菌I－SceI DH10B；(2)结合转移用供体质粒的构建；(3)cre/loxp重组位点取代BmBacmid基因组中的v－cath和chitin基因，2个I－SceI位点取代BmBacmid中的p70基因获得受体I－sceI BmMultibac；(4)利用cre－loxp重组、Tn7重组和结合转移三种方法引入外源基因；(5)常规方法制备重组Bacmid DNA并转染昆虫细胞或者注射家蚕幼虫。本发明获得BmNPV－家蚕幼虫多基因表达系统，为研究多亚基蛋白、蛋白与蛋白之间相互作用以及制备病毒样颗粒奠定基础。 | ||
| 搜索关键词： | bmnpv 家蚕 幼虫 多基因 表达 系统 构建 方法 | ||
【主权项】：
1.一种BmNPV—家蚕幼虫多基因表达系统构建方法，其特征在于：该构建方法按下列步骤顺序完成：(1)将阿拉伯糖启动子(pBAD)控制的I-SceI表达盒重组到E.coli DH10B的基因组中获得新的受体菌I-SceI DH10B；(2)结合转移用供体质粒的构建；(3)cre/loxp重组位点取代BmBacmid基因组中的v-cath和chitin基因，2个I-SceI位点取代BmBacmid中的p10基因获得受体I-sceI BmMultibac；(4)利用cre-loxp重组、Tn7重组和结合转移三种方法引入外源基因；(5)常规方法制备重组Bacmid DNA并转染昆虫细胞或者注射家蚕幼虫。
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