[发明专利]一种固定化微生物制备光学纯(R)-2-辛醇的方法

摘要

本发明公开了一种微生物法制备高光学纯(R)-2-辛醇的方法及其微生物。本发明固定化细胞合成法具有如下优势：1.固定化工艺简单，固定化酵母细胞在反应体系中有一定的抗毒性，催化效果好，可重复使用。2.非极性大孔吸附树脂为载体制备的固定化细胞，弹性好，对温度、pH值的耐受性强，机械强度高，酶活稳定，半衰期长。3.在有机溶剂/缓冲溶液两相中进行反应，可减少有机溶剂对细胞的毒害作用，提高其催化活性。4.固定化酵母细胞催化制备光学纯(R)-2-辛醇，工艺简单，不需添加昂贵的辅酶，条件温和，反应时间短，几无副产物，光学纯度高达90.25％e.e.，后续处理简单，产物易分离，环境友好。

主权项

1、一种固定化微生物制备光学纯(R)-2-辛醇的方法，其特征包括以下步骤：(1)、非极性大孔吸附树脂预处理：将非极性大孔吸附树脂用去离子水清洗后用含0.5-5.0％的NaOH溶液浸泡24-48h，用去离子水清洗至中性，烘干；(2)、面包酵母固定化：常规培养面包酵母DX213 Saccharomyces cerevisiaeDX213 CCTCC NO：M 207082，得菌液，将非极性大孔吸附树脂浸泡于菌液中，菌液温度25-35℃，pH值为6.0-8.0，摇瓶转数100-400rpm，固定菌种24-48h，滤去菌液，并用生理盐水洗涤，将固定化细胞热处理10-60min，制得非极性大孔吸附树脂固定化面包酵母；(3)、固定化面包酵母催化2-辛酮制备光学纯(R)-2-辛醇：将固定化细胞溶于0.1mol/L的Tris-HCl缓冲液中，使其浓度为0.2-0.5g/mL，倒入有机溶剂四氢呋喃、二氯甲烷、正己烷、甲苯、正乙烷或石油醚的一种中，使其有机溶剂/缓冲溶液体积比为5/30-35/0，然后分2-5批次添加2-辛酮，使其质量浓度24-60mmoL/L，以葡萄糖、蔗糖、1，2-丙二醇、甲醇或柠檬酸中的一种为辅助底物，添加量为0.5-3.0g，反应体系中缓冲溶液pH值为3.0-10.0，反应温度26-36℃，反应时间2-72h，得光学纯(R)-2-辛醇。