[发明专利]一种促进兰科植物种子萌发的真菌的分离及筛选方法

摘要

本发明涉及生物技术领域的一种方法，特别是公开了一种促进兰科植物种子萌发的真菌的分离及筛选方法。主要是将种子放置到适宜兰科植物生长的环境中，种子萌发后，取回种子、原球茎和幼苗，表面消毒后，把上述材料切为小块或挑取单个菌丝团放到分离共生真菌的培养基上，获得纯化的菌株，使用筛选体系筛选出促进兰科植物种子萌发的有效真菌。本方法简便易行，材料易于回收，种子共生萌发真菌分离效果好，筛选工作量小。

主权项

1、一种促进兰科植物种子萌发的真菌的分离及筛选方法，包括步骤：(1)兰科植物种子的播种：采集兰科植物近成熟或成熟期的果实，收集种子并装在袋中，将袋放置于适宜兰科植物生长的环境中；制作袋的材料可以为：微孔塑料膜或化纤布或棉布或尼龙网；(2)促进兰科植物种子萌发的真菌的分离及纯化：装好种子的袋子放置后，定期检查种子发育情况，发现种子萌发后，取出袋子带回；取出袋内的种子或原球茎或幼苗材料，表面消毒处理后，将其剪切成小块或挑取单个菌丝圈接种到分离真菌的培养基上培养，待生长出真菌菌丝后，将真菌转接到常规真菌培养基上进行纯化；(3)兰科植物种子萌发真菌的筛选：采集兰科植物果实获得种子，将种子播种在经过灭菌的载体上；在装有有机物固体培养基的容器内分别接种上述纯化的真菌，同时将播种子的载体放在上述接真菌的有机物固体培养基表面；将培养容器置于8-27℃的环境中共培养，其中能促进兰科植物种子萌发的真菌即为有效真菌。