[发明专利]从牛初乳中分离乳腺上皮细胞的体外培养方法无效

专利信息
申请号: 200810072887.X 申请日: 2008-05-26
公开(公告)号: CN101591636A 公开(公告)日: 2009-12-02
发明(设计)人: 李文蓉;谭立新;牛志刚 申请(专利权)人: 新疆维吾尔自治区畜牧科学院中国-澳大利亚绵羊育种研究中心
主分类号: C12N5/06 分类号: C12N5/06
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 830000新疆维吾尔*** 国省代码: 新疆;65
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摘要: 发明公开了一种从牛初乳中分离乳腺上皮细胞的体外培养方法。针对目前乳腺上皮细胞体外培养方法中存在的组织取材不易、培养成功率低等问题,我们采用从泌乳2-7天的牛初乳中分离培养乳腺上皮细胞,进行原代培养。培养液为:RPMI-1640,添加胎牛血清20%、胰岛素1μg/ml、醋酸钠5mM、转铁蛋白10μg/ml、青霉素100U/ml、链霉素100μg/ml等,培养条件为37℃,5%CO2。细胞接种在胶原包被的培养瓶内,经过15-18天培养,细胞可铺满瓶子底壁,并可传代。用角蛋白-18抗体对所培养细胞进行免疫组化鉴定,结果呈阳性,证明所培养细胞系确为乳腺上皮细胞。用ELLISA和RT-PCR方法从原代培养的牛乳腺上皮细胞中均检测到了β-酪蛋白,表明所培养的乳腺上皮细胞具有泌乳功能,可用于多种体外研究。
搜索关键词: 牛初乳 分离 乳腺 上皮细胞 体外 培养 方法
【主权项】:
1、一种从牛初乳中分离和培养乳腺上皮细胞的培养液,包括各种培养成份含量是RPMI-164075-80%、胎牛血清20%、胰岛素1ug/ml、醋酸钠5mM、转铁蛋白10ug/ml、青霉素100U/ml、链霉素100ug/ml。
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