[发明专利]一种以石榴皮为原料酶法制备鞣花酸的方法

摘要

本发明涉及一种以石榴皮为原料酶法制备鞣花酸的方法。属食品、医药、化工领域。本发明以我国大量被人们废弃的石榴皮为原料提取鞣花单宁，利用酶的催化效率高，选择性强，作用条件温和等特点，通过发酵，获得含降解鞣花单宁的单宁酶，与鞣花单宁发生酶促反应，生成鞣花酸，经过溶剂结晶纯化，获得价格昂贵的医用高纯度的鞣花酸。本发明可降低原料成本，废物利用，并提高鞣花酸产量和纯度，适合大规模的生产。

主权项

1. 一种以石榴皮为原料酶法制备鞣花酸的方法，通过单宁酶与鞣花单宁的酶促反应，得到鞣花酸粗产品，经溶剂结晶纯化获得纯鞣花酸，具体步骤和条件为：A鞣花单宁的提取将烘干的石榴皮粉碎后，加入到体积浓度为20～60％的乙醇水溶液中，置于功率为80-100W的超声波作用下超声处理2-3次，每次25-40分钟，得到鞣花单宁的乙醇水溶液，浓缩回收乙醇后，得到鞣花单宁浓缩液；B单宁酶的发酵培养将黑曲霉Aspergillus niger3.316接种于发酵培养基中，25-30℃下培养20-24小时，移至产酶培养基中，在25-30℃下培养4-6天，离心并用去离子水洗涤，获得含单宁酶的菌体，加入pH＝5.0的柠檬酸缓冲液得到菌悬液，菌悬液于冰浴中在功率400-600W的超声波作用下进行超声破碎，破碎时间为20-30分钟，得到单宁酶的粗酶液；C酶促转化反应将步骤A得到的鞣花单宁浓缩液，加水稀释至原来体积的1-2倍，用NaOH水溶液调节pH至5.0-5.5，将步骤B得到的粗酶液加入其中，粗酶液与稀释后的鞣花单宁溶液的体积比为1∶2-3，在25-30℃下酶促转化反应40-48小时，反应液经过滤，得到鞣花酸粗产品；D溶剂结晶纯化将步骤C得到的鞣花酸粗产品加入甲醇，在70～80℃温度下萃取3～9小时后，将萃取液浓缩至饱和，降至室温结晶，反应液过滤后，滤饼经水洗、干燥，得到淡黄色鞣花酸产品。