[发明专利]一种制备聚合度为4－7的壳寡糖的方法

摘要

本发明公开了一种制备聚合度为4－7的壳寡糖的方法，属生物技术领域。采用脱乙酰化度75－95％的壳聚糖为原料，用浓度为1％的乙酸溶解其浓度(W/V)为1－5％乙酸溶解，加入壳聚糖内切酶3－6u/g壳聚糖水解，粘度下降70％，继续水解后，间隔一定时间取上述水解液2ml，加入2ml 1mol/L的NaOH，使其成为碱性酶解液。当碱性液透光率达到70－85％时，100℃灭酶，离心20分钟，取上清液，浓缩至固形物含量10－20％，用乙醇或丙酮(终浓度为85－95％)沉淀，再复溶和离心，最后真空干燥，得到本发明聚合度为4－7的壳寡糖，得率为85－90％。本发明用单一酶降解壳聚糖，具有酶解效率高，酶解可在2小时内完成，制备过程控制方便，具有应用和推广价值。

主权项

1. 一种制备聚合度为4-7的壳寡糖的方法，其特征在于按下面方法操作：(1)壳聚糖原料：脱乙酰化度为75-95％的壳聚糖；(2)壳聚糖乙酸溶液：壳聚糖用浓度为1％乙酸水溶液溶解，壳聚糖乙酸溶液重量体积百分比浓度为1％-5％；(3)酶法水解：加壳聚糖内切酶3-6u/g壳聚糖，40-60℃，水解15-20分钟，黏度下降70％后，继续水解，水解80-100分钟左右；(4)加NaOH：取上述水解液2ml，加入2ml 1mol/L的NaOH，使其成为碱性酶解液；(5)检测碱性酶解液的透光率及灭酶：当上述碱性酶解液透光率达到70-85％，100℃灭酶15分钟；(6)离心：离心机转速为5000rpm，离心20分钟，取上清液；(7)浓缩：真空浓缩至固形物含量为10-20％；(8)有机溶剂沉淀：用终浓度为85-95％乙醇或丙酮有机溶剂沉淀法，去除少量单糖、二糖，取沉淀；(9)复溶：用水复溶解，固形物含量20％；(10)再离心：离心机转速为5000rpm，离心20分钟，取上清液；(11)干燥：采用真空干燥法将上清液干燥，得到本发明聚合度为4-7的壳寡糖。