[发明专利]一种新型非限制性核酸内切酶在大肠杆菌中的表达及应用无效
申请号: | 200710041024.1 | 申请日: | 2007-05-22 |
公开(公告)号: | CN101311268A | 公开(公告)日: | 2008-11-26 |
发明(设计)人: | 汪寄宇;张建新 | 申请(专利权)人: | 上海拜朗生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/55 | 分类号: | C12N15/55;C12N9/22;C12N1/21;C12P19/30;C12Q1/68 |
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地址: | 201108上海市长*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明利用来源于Anabaena sp.的非特异性核酸内切酶具有天然抑制剂蛋白的性质,改变了非特异性核酸内切酶原有的表达形式,即改分泌表达为胞内高效表达,采用强启动子以无活性的包涵体形式在胞内大量表大,在表达该酶的同时,一起表达其天然抑制剂蛋白,以消除极少量有活性的核酸酶对细胞的强毒性,并利用蛋白质工程技术置换掉一个非活性中心氨基酸,减少了复性时形成多聚体的可能性,提高了复性效率。从提高表达效率和复性效率两方面提高了产量。 | ||
搜索关键词: | 一种 新型 限制性 核酸 内切酶 大肠杆菌 中的 表达 应用 | ||
【主权项】:
1.一种编码新型非限制性核酸内切酶的DNA序列,其特征在于该DNA序列与来源于Anabaena sp.Anabaena sp.PCC 7120的染色体DNA序列相比,第496位的胸苷酸变异为腺苷酸,并在起始密码子ATG后加上六个组氨酸密码子(CATCACCATCACCATCAC)。
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