[发明专利]一种表告依春的分离制备方法

摘要

本发明涉及天然药物的分离，具体地说是一种表告依春的分离制备方法，将板蓝根植物粉碎后，8－12倍量水煎煮得到提取液，再浓缩得到浸膏，加入乙醇醇沉两次，醇沉上清液浓缩，回收乙醇，浓缩液经过高速离心机过滤，滤液经膜分离机分离，透过液通过大孔树脂柱层析分离制备，乙醇水梯度洗脱，得到组分再经高效工业色谱柱分离制备，甲醇水梯度洗脱，收集洗脱液浓缩冷冻干燥即得表告依春。本发明产品纯度高、制备量大，工艺稳定可靠，特别适用于自中药板蓝根中分离制备大量的高纯度的表告依春化合物。

主权项

1.一种表告依春的分离制备方法，其特征在于：1)提取：称取板蓝根原药材，加入其重量8-12倍的水煎煮提取2-3次，每次1-3小时，得到提取液，将提取液浓缩得浸膏；2)醇沉：将浸膏中加入乙醇使乙醇体积浓度达到50-70％，0-4℃冷藏静置12-24小时，过滤，取滤液浓缩；再加入乙醇使乙醇体积浓度达到75-80％，0-4℃冷藏静置12-24小时过滤，取滤液浓缩挥发除去乙醇，样品溶液经过10000-25000转/分钟的高速离心机离心；3)过膜：将离心液经过截留分子量500-10000Da中空纤维膜分离仪分离，操作压力0.05-0.3MPa，截留液弃去，透过液即为膜分离组分；4)非极性大孔树脂分离：将膜分离组分上样于非极性大孔树脂柱，上样量与分离材料体积比为1∶100-500，分别采用流动相体积浓度5-20％的乙醇和40-60％乙醇洗脱，每次洗脱的体积为3-6个柱体积，流速为1-3个柱体积/小时；循环洗脱，洗脱液浓缩，浓缩至浓度为0.1-0.5克/毫升，过0.2-0.4微米滤膜，即为表告依春大孔树脂分离组分；4)工业色谱分离：以粒径5-20微米的C18硅胶键合固定相为色谱填料，以甲醇和水为流动相，梯度洗脱，甲醇的体积浓度从0-100％变化，收集目标组分，冷冻干燥即为表告依春。