[发明专利]单性生殖激活人类卵母细胞用于产生人类胚胎干细胞

摘要

公开了通过调节O₂张力从而单性生殖激活人卵母细胞产生人类干细胞的方法，其包括在高O₂张力下调节Ca²⁺和在低O₂张力下使卵母细胞与丝氨酸-苏氨酸激酶抑制剂接触，从激活的卵母细胞分离内细胞团(ICMs)，和在高O₂张力下培养分离的ICMs的细胞。而且，描述了在缺少非人动物产品的情况下从激活的卵母细胞产生干细胞的方法，包括用人饲养细胞/产品培养ICM/干细胞。也描述了通过公开的方法所产生的干细胞。

主权项

1. 产生人干细胞的方法，其包括：a)单性生殖激活人卵母细胞，其中所述激活包括：i)在高O2张力下使所述卵母细胞与离子载体接触，和ii)在低O2张力下使所述卵母细胞与丝氨酸-苏氨酸激酶抑制剂接触；b)在低O2张力下培育步骤(a)所述的激活卵母细胞，直到胚泡形成；c)将所述胚泡转移到饲养细胞层，并在高O2张力下培养所述转移胚泡；d)将内细胞团(ICM)从步骤(c)所述胚泡的滋养外胚层机械地分离出来；和e)在饲养细胞层上培养步骤(d)所述的ICM的细胞，其中所述培养步骤(e)在高O2张力下进行。