[发明专利]一种大肠杆菌高效外分泌表达溶葡萄球菌酶的方法有效
| 申请号： | 200680026815.0 | 申请日： | 2006-07-11 |
| 公开（公告）号： | CN101228271A | 公开（公告）日： | 2008-07-23 |
| 发明（设计）人： | 黄青山;陆婉英;陆海荣 | 申请（专利权）人： | 上海高科联合生物技术研发有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/00 | 分类号： | C12N15/00;C12N15/09;C12N9/48;C12N9/52;C12N1/20;C07K14/31;C12P21/02 |
| 代理公司： | 中原信达知识产权代理有限责任公司 | 代理人： | 杨青;樊卫民 |
| 地址： | 中国*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供一种大肠杆菌高效外分泌表达溶葡萄球菌酶的方法，包括将适合在大肠杆菌中分泌表达的编码信号肽的序列克隆于部分或全部成熟溶葡萄球菌酶的基因序列前，并与启动子相连，构建表达载体；将表达载体转化大肠杆菌，培养发酵；从发酵液上清液中分离溶葡萄球菌酶。外分泌表达的优点在于表达产物以最终的活性形式存在于培养基中，无包涵体复性等步骤；从培养上清中纯化较简单，回收率高；宿主菌蛋白污染少。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 大肠杆菌 高效 外分泌 表达 葡萄球菌 方法 | ||
【主权项】：
1.一种大肠杆菌外分泌表达溶葡萄球菌酶的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)表达载体的构建：包括将编码信号肽的DNA序列克隆于部分或全部成熟溶葡萄球菌酶的基因序列前，并与启动子相连；(2)转化大肠杆菌，使其含有步骤(1)所构建的载体，培养发酵；(3)从发酵液上清液中分离溶葡萄球菌酶。
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