[发明专利]一种大豆脂肪酸的微量检测方法

摘要

本发明属于农业生产技术领域。是一种大豆脂肪酸含量微量检测方法。本发明在传统大豆脂肪酸检测方法的基础上，采用半粒法进行取样，以己烷为内标物，结合甘油三酯对大豆籽粒中的脂肪酸总量进行萃取，然后加入氢氧化钾的甲醇溶液在水浴中进行甲酯化，把得到的甲酯化的脂肪酸混合物离心后，取上清液在气相色谱上进行精确定量检测，对于大豆优质油份育种和改良具有重要的现实意义。

主权项

1.一种大豆脂肪酸的检测方法，其特征在于采用半粒法进行取样，以己烷为内标物，结合甘油三酯对大豆籽粒中的脂肪酸总量进行萃取，然后加入氢氧化钾的甲醇溶液在水浴中进行甲酯化，把得到的甲酯化的脂肪酸混合物离心后，取上清液在气相色谱上进行精确定量检测，提取和检测程序如下：a.前期样品准备单个籽粒编号后，用壁纸刀片在豆粒的远脐端多次切取薄薄的碎片(注意不要超过籽粒的1/3)，用天平称取10-12毫克，放入编好号的带盖塑料试管中；b.脂肪酸的提取和甲酯化每个样品中加入2ml己烷甘油三酯溶液→立即加入2mol/l的氢氧化钾甲醇溶液200μl，并盖上盖→匀质器混匀10秒→轻轻震荡100次→5℃水浴15分钟→加入35μl甲醇和2ml超纯水终止反应→25℃用离心机以2000-2500转/分钟离心6分钟→吸取500μl上清液准备分析；c.脂肪酸的气相色谱检测条件：氢火焰离子化检测器(FID)，量程3，衰减2，担体GAS：CHROMSORB-Q，80～100目，固定液DEGS，担体与固定液配比100∶4；色谱柱为不锈钢柱1000mm×3.2mm(内径)，柱温180℃，气化室240℃，检测室240℃；气体：载气N260ml/min，燃气H250ml/min，助燃气体空气500ml/min，纸速2.5cm/min，每样品重复3次，进样量0.5μl；各脂肪酸组分含量由对应的峰面积与内标物的峰面积的比值求得。