[发明专利]用金磁微粒去除高丰度蛋白的方法

摘要

本发明涉及一种采用金磁微粒去除血清/浆等生物样品白蛋白和/或抗体等高丰度蛋白方法。金磁微粒是指以磁性纳米粒子或磁性纳米粒子的聚集体为核，在核表面包覆单质金、银等贵金属壳层形成的磁性复合微粒，也指以磁性纳米粒子或磁性纳米粒子的聚集体为核，在核表面组装纳米金、银等贵金属粒子形成的磁性复合微粒。本发明是通过亲和层析的方法将高丰度蛋白的亲和配基固定到金磁微粒表面，利用白蛋白或/和抗体与其相应亲和配基的亲和作用以及金磁微粒的超顺磁性从而在磁场中将白蛋白或/和抗体等高丰度蛋白从血清/浆等生物样品中分离出来以达到去除的目的。具有去除效率高、去除的特异性强、去除过程便捷的优点。

主权项

1.一种用金磁微粒去除高丰度蛋白的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：1]用金磁微粒固定高丰度蛋白的亲和配基：取金磁微粒置于离心管中，磁性分离，弃上清；用偶联缓冲液清洗两次，磁性分离，弃上清；加入溶解在偶联缓冲液中的高丰度蛋白亲和配基，20～40℃条件下，充分反应10min～30min，磁性分离，弃上清；加入清洗缓冲液清洗，磁性分离，弃上清；加入保存缓冲液，2～8℃保存备用；2]稀释待处理生物样品：对待处理生物样品用去除缓冲液进行稀释；3]将金磁微粒和待处理生物样品共同反应：将固定了高丰度蛋白亲和配基的金磁微粒磁性分离，弃上清，加入去除缓冲液，混合均匀，磁性分离，弃上清；加入稀释后的待处理生物样品，20～40℃条件下，充分反应5min～60min；4]去除高丰度蛋白：将反应后的金磁微粒磁性分离，移取分离后上清即为去除了白蛋白或/和抗体的生物样品。