[发明专利]层叠杂交荧光放大磁分离检测DNA的方法无效
| 申请号： | 200610035695.2 | 申请日： | 2006-05-31 |
| 公开（公告）号： | CN101082583A | 公开（公告）日： | 2007-12-05 |
| 发明（设计）人： | 聂立波;贺全国;陈洪;何农跃 | 申请（专利权）人： | 中山耐乐生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 中山市科创专利代理有限公司 | 代理人： | 尹文涛 |
| 地址： | 528437广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种层叠杂交荧光放大磁分离检测DNA的方法。它的技术要点在于包括下列步骤：在SiO2纳米颗粒上同时标记a，b两种序列不同的DNA；在磁性纳米颗粒表面标记e序列的DNA；第一次三明治杂交：靶DNA的一端与SiO2纳米颗粒上b序列的DNA杂交，靶DNA的另一端与磁性纳米颗粒上e序列的DNA杂交；另一种SiO2纳米颗粒上同时标记c，d两种序列不同的DNA；另一种SiO2纳米颗粒上c序列的DNA与荧光DNA杂交；第二次三明治杂交：第一次三明治杂交后的SiO2纳米颗粒上a序列的DNA与连接DNA的一端杂交，连接DNA的另一端与荧光杂交后的纳米颗粒上d序列的DNA杂交；第二次三明治杂交后产物经磁分离清洗后，去除多余的荧光分子和非特异性吸附；再将第二次三明治杂交后产物DNA变性，解链后的荧光DNA即可进行荧光检测。本发明克服了现有技术的不足，提供了一种操作简单、超灵敏的DNA检测方法。 | ||
| 搜索关键词： | 层叠 杂交 荧光 放大 分离 检测 dna 方法 | ||
【主权项】：
1、一种层叠杂交荧光放大磁分离检测DNA的方法，其特征在于包括下列步骤：(A)、在SiO2纳米颗粒上同时标记a，b两种序列不同的DNA；(B)、在磁性纳米颗粒表面标记e序列的DNA；(C)、第一次三明治杂交：靶DNA的一端与SiO2纳米颗粒上b序列的DNA杂交，靶DNA的另一端与磁性纳米颗粒上e序列的DNA杂交；(D)、另一种SiO2纳米颗粒上同时标记c，d两种序列不同的DNA；(E)、另一种SiO2纳米颗粒上c序列的DNA与荧光DNA杂交；(F)、第二次三明治杂交：第一次三明治杂交后的SiO2纳米颗粒上a序列的DNA与连接DNA的一端杂交，连接DNA的另一端与荧光杂交后的纳米颗粒上d序列的DNA杂交；(G)、第二次三明治杂交后产物经磁分离清洗后，去除多余的荧光分子和非特异性吸附；再将第二次三明治杂交后产物DNA变性，解链后的荧光DNA即可进行荧光检测。
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