[发明专利]基于环状介导等温扩增技术的基因快速诊断方法

摘要

基于环状介导等温扩增技术的基因快速诊断方法，涉及生物检测技术领域，具体是用体外生物检测试剂快速检测病原微生物的一种技术。包括如下步骤：一、对被检样品进行预处理；二、包括目标靶基因数据库的建立；生物信息学的分析比较；基因组多态性的分型处理和简并碱基的运用，获得各种靶基因的特异性引物两对，分别与靶基因中的六个独立区域序列特异性匹配；三、进行环介导等温扩增反应；四、分析判断结果。该方法的优点：不需特殊试剂与设备；高特异性；.灵敏度高；鉴定简便；用途广：可用于食品、药品、化妆品等领域的质量控制和环境、水质等监测；用于医学临床诊断，用于代谢性疾病和遗传疾病的基因诊断。

主权项

1、一种基于环介导等温扩增技术的基因快速诊断方法，包括如下步骤：一、对被检样品进行预处理，从而快速提取DNA或快速提取RNA；二、特异性引物制备：确定待测样品的靶基因后，取得特异性引物；三、进行环介导等温扩增技术反应：将经前处理的样品、引物、反应缓冲液与Bst DNA聚合酶混合，在63～65℃保温0.5至1.5小时进行循环链置换反应；四、判断结果，其特征在于：所说的步骤二特异性引物制备：包括目标靶基因数据库的建立；生物信息学的分析比较；基因组多态性的分型处理和简并碱基的运用，从而获得所需各种靶基因的特异性引物两对，为内引物和外引物各一对，经DNA合成仪生成寡聚脱氧核苷酸引物，且分别与靶基因中的六个独立区域序列特异性匹配；步骤四、分析判断反应产物结果：在反应产物中加入荧光染料混匀，静置5min，反应产物显现绿色为阳性，显橙色则为阴性。