[发明专利]检测和/或鉴定腺伴随病毒(AAV)序列以及分离所鉴定的新型序列的方法有效

专利信息
申请号: 02827059.2 申请日: 2002-11-12
公开(公告)号: CN101426935A 公开(公告)日: 2009-05-06
发明(设计)人: G·高;J·M·威尔森;M·阿尔维拉 申请(专利权)人: 宾夕法尼亚州立大学托管会
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70
代理公司: 上海专利商标事务所有限公司 代理人: 周承泽
地址: 美国宾夕*** 国省代码: 美国;US
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摘要: 发明提供了从组织或细胞来源样品的DNA中检测和分类AAV序列的方法。本发明还提供了用该方法鉴定的AAV序列以及用这些序列构建的载体。
搜索关键词: 检测 鉴定 伴随 病毒 aav 序列 以及 分离 新型 方法
【主权项】:
1. 一种检测样品中腺伴随病毒(AAV)的方法,所述方法包括以下步骤:(a)利用特应性扩增AAV核酸序列第一区的第一组引物通过聚合酶链式反应(PCR)扩增含DNA的样品;(b)任选利用特应性扩增第二区的第二组引物进一步扩增DNA,所述第二区包括AAV序列的第一区和第一区5’端的序列,这样就获得了AVV5’延伸序列,该序列可对用第一区引物扩增的AAV序列的5’末端退火;(c)任选利用特应性扩增第三区的第三组引物进一步扩增DNA,所述第三区包括AAV序列的第一区和第一区3’端的序列,这样就获得了AVV3’延伸序列,该序列可对用第一区引物扩增的AAV序列的3’末端退火,其中,所述每一区都是基于至少两个AAV血清型的核酸序列的比对预先确定的,所述每一区都包括在5’末端至少18个碱基对上高度保守的核酸序列,中间可任选添加可变序列以及在该区序列3’末端的至少18个碱基对上高度保守的序列,这相对于至少两个比对的AAV血清型的序列;以及其中每组引物由5’引物和3’引物组成;其中扩增序列的存在说明样品中存在AAV。
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