[发明专利]一种食品功能因子γ－氨基丁酸的制备方法

摘要

一种食品功能因子γ－氨基丁酸的制备方法，具体涉及利用微生物生物转化制备γ－氨基丁酸(GABA)的一种方法，属于食品生物技术领域。用乳酸菌或者乳酸菌和酵母菌混用作为菌种，以L－谷氨酸钠为转化底物，添加碳源、氮源以及无机盐组成发酵培养基，利用发酵法生物转化制备γ－氨基丁酸。所选乳酸菌在MRS、PYG培养基中，25℃～40℃条件下培养时，生长良好，可作为种子培养液。发酵生产时，培养基适宜的碳源采用葡萄糖，氮源可选用玉米浆、酵母膏、脱脂花生饼粉、脱脂棉籽饼粉、脱脂豆粕粉、米糠、酪蛋白等中的一种或者几种混用。发酵后经检测，γ－氨基丁酸在发酵液中的浓度高达300～500mg/100ml。本发明所得产品安全可靠，具有很高的生理功能。

主权项

1.一种γ-氨基丁酸的制备方法，其特征是用乳酸菌(lactobacillusplantarum，streptococcuslactis，Lactococcuslactis，Lactobacilluscasei)或乳酸菌和酵母菌(Saccharomycessp)混用作为菌种，以L-谷氨酸钠(L-MSG)为转化底物，采用适当碳源和氮源以及无机盐组成发酵培养基，发酵法生物转化制备γ-氨基丁酸，A.菌种采用单一乳酸菌或乳酸菌和酵母菌混用作为菌种，B.培养基琼脂斜面保藏培养基(％)：酵母膏1.0％，葡萄糖1.5％，碳酸钙1.5％，琼脂1.5％，24#乳酸菌培养基(％)：牛肉膏0.5％，酵母膏0.5％，葡萄糖1.0％，乳糖0.5％，蛋白胨1.0％，NaCl0.5％，琼脂2.0％，pH6.8，PY基础培养基(％)：内含蛋白胨0.5％，胰胨(Tryptone)0.5％，酵母提取物1.0％，盐溶液4.0ml/100ml，(盐溶液g/1000ml含CaCl2，0.2；MgSO4·7H2O，0.48；K2HPO4，1.0；KH2PO4，1.0；NaHCO3，10.0；NaCl，2.0)，pH6.8，发酵种子培养基：MRS液体培养基，GYP发酵培养基(％)：葡萄糖1.0％，酵母膏1.0％，蛋白胨0.5％，乙酸钠0.2％，L-MSG1.0％，MgSO4·7H2O20ppm，MnSO4·4H2O1ppm，NaCl1ppm，FeSO1·7H2O1ppm，pH6.8，C.制备工艺菌种保存：所选菌种根据要求分别在琼脂斜面保藏培养基、24#乳酸菌培养基上传代，冰箱4℃保存，2～4周转接一次，使用前活化2次，种子培养：在GYP发酵培养基或者MRS液体培养基中进行，发酵前经2次传代，培养16小时，发酵：培养16小时的种子培养液离心收集菌体，用无菌水制成菌体悬浮液(～109CFU/ml)，以0.2％～2.0％的接种量，接入添加不同碳源和氮源的PY基础培养基中，250ml三角瓶中的装液量为50ml，碳源分别为葡萄糖，麦芽糖，可溶性淀粉，以及它们与L-谷氨酸钠(L-MSG)的混合物，添加水平0.5％～3％，氮源分别为蛋白胨、胰胨、酪蛋白、酪蛋白磷酸肽(CPP)、脱脂豆粕粉，玉米浆、酵母膏、脱脂花生饼粉、脱脂棉籽饼粉、米糠、酪蛋白等，添加水平0.5％～5％，25℃～40℃静置培养1～6天，得到γ-氨基丁酸发酵液，所得到的终了发酵液中，γ-氨基丁酸含量可达到300～500mg/100ml，此溶液脱臭后，可直接干燥制成粉剂，粉剂中γ-氨基丁酸含量在5％以上，也可进一步精制纯化，用作功能性食品添加剂，D.结晶纯化将γ-氨基丁酸溶液用强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂进行离子交换，氨水洗涤、提取，再经树脂纯化、浓缩、结晶、干燥后即得成品γ-氨基丁酸。