[发明专利]牦牛血超氧化物歧化酶及其提取纯化工艺和应用

摘要

本发明涉及一种牦牛血超氧化物歧化酶及其提取纯化工艺和应用,所述的超氧化物歧化酶是将牦牛血经去血浆、洗涤、溶血、抽提去杂蛋白、分离、沉淀、透析、超滤浓缩后得到牦牛血SOD;本发明的酶总活力高达90万单位/l,平均酶比活为13000u/mg,本发明的工艺可减少SOD的酶总活损失,得率高、生产周期短、使用试剂省、操作简单;本发明可作药品、保健品和食品、化妆品添加剂用。

主权项

1、一种牦牛血超氧化物歧化酶，其特征在于它由下述方法制备获得：①将牦牛血去除血浆得红血球，用红血球的2-4倍体积的盐液清洗红血球2-6次，再往红血球内加入0.5-1.5倍的水，搅拌使其溶血；②将溶血液冷却至4-4℃，加入溶血液体积的0.15-0.35倍、温度为至少-10℃、浓度为9-98％的醇和溶血液体积的0.1-0.2倍、浓度为90-98％的氯仿，混合后再稀释去除杂蛋白得蛋黄色上清液；③将醇相上清液升温至室温再加入体积比为1∶(0.5-1.5)的固体磷酸氢二钾；分离得淡蓝色上清液；④将③步最后的上清液冷却至至少0℃，再加入上清液体积的0.5-1倍、温度为至少-10℃的丙酮，然后得到沉淀物，用水溶解沉淀物，将溶解液置于透析袋中相对于2.5mm、PH7-6的KH2PO4-K2HPO4的缓冲液透析，离心透析液得淡绿色清液，⑤将淡绿色清液进行超滤即得超氧化物歧化酶。