[发明专利]牦牛血超氧化物歧化酶及其提取纯化工艺和应用

权利要求书

1、一种牦牛血超氧化物歧化酶，其特征在于它由下述方法制备获得：①将牦牛血去除血浆得红血球，用红血球的2-4倍体积的盐液清洗红血球2-6次，再往红血球内加入0.5-1.5倍的水，搅拌使其溶血；②将溶血液冷却至4-4℃，加入溶血液体积的0.15-0.35倍、温度为至少-10℃、浓度为9-98％的醇和溶血液体积的0.1-0.2倍、浓度为90-98％的氯仿，混合后再稀释去除杂蛋白得蛋黄色上清液；③将醇相上清液升温至室温再加入体积比为1∶(0.5-1.5)的固体磷酸氢二钾；分离得淡蓝色上清液；④将③步最后的上清液冷却至至少0℃，再加入上清液体积的0.5-1倍、温度为至少-10℃的丙酮，然后得到沉淀物，用水溶解沉淀物，将溶解液置于透析袋中相对于2.5mm、PH7-6的KH₂PO₄-K₂HPO₄的缓冲液透析，离心透析液得淡绿色清液，⑤将淡绿色清液进行超滤即得超氧化物歧化酶。

2、一种牦牛血超氧化物歧化酶的提取纯化工艺，其特征在于包括下述工艺步骤：①将牦牛血除去血浆得红血球，用红血球体积的2-4倍、0.5-1.5％的盐液清洗红血球2-6次，再往红血球内加入体积比为1∶(0.5-1.5)的水，搅拌后使其溶血；②将溶血液冷却至4-4℃，搅拌加入溶血液体积的0.15-0.35倍、温度为至少-10℃、90-98％的醇和溶血液体积的0.1-0.2倍、90-98％的氯仿，混合搅拌，再加入溶血液体积的0.2倍的水稀释，离心去除杂蛋白，得蛋黄色上清液，测定其SOD总活力；③将乙醇相上清液升至室温，加入上清液体积的0.5-1.5倍的固体磷酸氢二钾溶解，静置分离得上相液，上相液含有氯仿、醇和少量盐，离心上相液得淡蓝色上清液；④将③步中最后的上清液冷却至至少0℃，边搅边加入上清液体积的0.5-1倍、温度为至少-10℃的丙酮，离心后得蓝绿色沉淀，然后往沉淀物中加入沉淀物体积的0.5-1.5倍的水溶解；溶解液放透析袋中相对于2.5mm、PH7.6的KH₂PO₄-K₄HPO₄缓冲液透析，离心透析液得淡绿色清液；⑤将淡绿色清液超滤即得牦牛血红胞超氧化物歧化酶。

3、如权利要求1所述的牦牛血超氧化物歧化酶的应用，其特征在于牦牛超氧化物歧化酶在保健品中的应用。

4、如权利要求1所述的牦牛血超氧化物歧化酶的应用，其特征在于牦牛血超氧化物歧化酶在药品中的应用。

5、如权利要求1所述的牦牛血超氧化物歧化酶的应用，其特征在于牦牛血超氧化物歧化酶在食品中的应用。

6、如权利要求1所述的牦牛血超氧化物歧化酶的应用，其特征在于牦牛血超氧化物歧化酶在化妆品中的应用。