[发明专利]获得修饰表型的方法和措施

权利要求书

1．一种减少正常能够在真核细胞中表达的目的核酸的表型表达的方法，包括导入含有下列可操作地连接的部分的嵌合DNA的步骤：

a)启动子，在所述的真核细胞中有效；

b)DNA区，当被转录时产生一种含有能够形成一种人工茎环结构的RNA区的RNA分子，其中茎环结构的退火RNA序列之一含有与所述目的核酸的至少部分核苷酸序列基本上相似的序列，而其中的第二个所述的退火RNA序列含有与所述目的核酸的至少部分所述核苷酸序列的至少部分互补序列基本上相似的序列；以及任选地

c)涉及转录终止及聚腺苷酸化的DNA区。

2．一种减少正常能够在真核细胞中表达的目的核酸的表型表达的方法，包括导入含有下列可操作地连接的部分的嵌合DNA的步骤：

a)启动子，在所述的真核细胞中有效；

b)DNA区，当被转录时产生一种具有包括如下的核苷酸序列的RNA分子

ⅰ．至少10个连续的与至少部分的所述目的核酸的核苷酸序列有75％到100％序列同一性的核苷酸的有义核苷酸序列；和

ⅱ．含有至少10个与所述有义核苷酸的所述至少10个连续的核苷酸的互补序列有75％到100％序列同一性的连续核苷酸的反义核苷酸序列；

其中的RNA能够通过在带有有义和反义核苷酸序列的区域间的碱基配对从而至少所述的有义序列的10个连续核苷酸与所述的反义序列的10个连续核苷酸进行碱基配对形成一种带有双链RNA茎的人工发夹RNA结构；以及任选地

c)．涉及转录终止及聚腺苷酸化的DNA区。

3．如权利要求2所述的方法，其中的所述RNA分子进一步含有位于所述有义和反义核苷酸序列之间的间隔核苷酸序列。

4．如权利要求2所述的方法，其中所述的有义核苷酸序列含有至少约550个连续的与所述核酸的至少部分核苷酸序列有75％到100％序列同一性的核苷酸。

5．如权利要求2所述的方法，其中所述的目的核酸是整合到所述真核细胞基因组中的基因。

6．如权利要求5所述的方法，其中所述基因是一个内源基因。

7．如权利要求5所述的方法，其中所述基因是一个外源基因。

8．如权利要求2所述的方法，其中所述嵌合DNA被稳定地整合到DNA的基因组中。

9．如权利要求5所述的方法，其中所述目的核酸包含在感染病毒的基因组中。

10．如权利要求9所述的方法，其中所述感染病毒是RNA病毒。

11．根据权利要求1的方法，其中的真核细胞是植物细胞。

12．如权利要求11所述的方法，其中所述植物细胞被包含在植物中。

13．一种减少正常能够在真核细胞中表达的目的核酸的表型表达的方法，包括导入含有至少一个具有一种核苷酸序列的RNA区的嵌合RNA分子的步骤，其中核苷酸序列包括

ⅰ．至少10个连续的与至少部分的目的核苷酸序列有75％到100％序列同一性的核苷酸的有义核苷酸序列；和

ⅱ．含有至少10个与所述的有义核苷酸的所说至少10个连续的核苷酸的互补序列有75％到100％序列同一性的连续核苷酸的反义核苷酸序列；

其中的RNA区能够通过在带有有义和反义核苷酸序列的区域间的碱基配对从而至少所述有义序列的10个连续的核苷酸与所述反义序列的10个连续核苷酸进行碱基配对形成一个带有一个双链RNA茎的人工发夹RNA结构。