[发明专利]人脑表达的X染色体连锁蛋白及其编码序列

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽—人脑表达的X染色体连锁蛋白(human brain expressed X-linked protein，简称“hBex”)，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

印记基因(imprinted genes)就是在生物体内存在着一些的基因或染色体，它们保留配子的某些特征并进行选择性差异表达。这些印记基因在生物体内的特异表达均通过一基因组印记过程来完成。基因组印记(genomic imprinting)即某一基因的个别等位基因根据其父母本的不同来源而进行特异性地表达。这些等位基因在配子形成过程中或在发育早期已被特异性地标识出来，且这一标识是可遗传的，一代代间是可逆的，其表达与否很可能存在稳定的外遗传修饰。在生物体内已证实存在100-200种不同的印记基因，其中只有20-30种被确定。现约有25种印记基因被证实具有稳定的外遗传修饰，其中一些被表明在肿瘤的发生过程中起作用[Joyce JA，Schofield PN；Mol Pathol 1998Aug；51：185-90]。研究发现，基因组印记在生物体内具有很多重要的生物学功能，其与胚胎发育、胚胎生长、各种增生滋生层疾病的发生及各种人体癌症的发生均有一定的关系[ChilosiM，Lestani M et al.，Adv Clin Path 1998 Jan；2：15-24]。

CAAX基序由一半胱氨酸残基后接两个脂肪族残基及一个C末端X残基组成，其中X可以是C、S、M、Q或A中的一个[Taparowsky，E.etal.，Cell，1983；34：581-86]。该基序为蛋白转运前修饰的靶位点，在生物体有着非常重要的生物学功能。研究发现，该基序中半胱氨酸残基的异戊二烯化直接影响着蛋白发挥正常的生物学功能。只有经异戊二烯化，蛋白才能正确地与细胞膜结合，调节细胞的分化与增殖。通常由GGTase(异戊二烯基转移酶)对其进行修饰，将法尼基或牦牛儿基转移至末端Cys残基上，修饰后利用高度变化的C末端来完成蛋白与细胞膜的结合与相互作用[Hancock JF，Cadwallader K，et al.，EMBO J1991Dev；10；4033-4039]。研究证实，已知的各种含CAAX基序的蛋白(如Ras蛋白，G蛋白等)均存在这一转运前修饰过程[Brown AL，Kay GF；Hum Mol Genet，1999，Apr；8：611-619]。这些蛋白高度变化的C末端决定了它们在不同细胞器膜上的定位。若C末端被去除，则这些蛋白与膜结合的特异性也将消失。另外，CAAX基序异戊二烯化修饰还可能与肿瘤发生及血胆脂醇过高等疾病有关[Schafer，W.R.；Rine，J.；Annu.Rev.Genet.，1992，26：209-237]。

已表明，印记基因与一些疾病相关，例如胚胎发育、胚胎生长、各种增生滋生层疾病。因此，为治疗目的研究和开发人印记基因及其编码蛋白，以及有关激动剂/抑制剂有重要意义。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽-人脑表达的X染色体连锁蛋白(human brain expressed X-linked protein，简称“hBex”)以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人脑表达的X染色体连锁蛋白的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人脑表达的X染色体连锁蛋白的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人脑表达的X染色体连锁蛋白的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽-人脑表达的X染色体连锁蛋白的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽-人脑表达的X染色体连锁蛋白的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断和治疗与人脑表达的X染色体连锁蛋白异常相关的疾病的方法。

在本发明的第一方面，提供新颖的分离出的人脑表达的X染色体连锁蛋白，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物、类似物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。