[发明专利]抗CD20单克隆抗体的重链和轻链可变区基因及其应用

说明书

本发明涉及抗CD₂₀单克隆抗体重链和轻链可变区基因，由所述基因编码的多肽，含有所述基因的载体及所述的基因和多肽在制备用于B淋巴细胞瘤的治疗和诊断的药物中的应用。具体地，本发明的重链和轻链可变区基因来自抗CD₂₀单克隆抗体HI₄₇。

B淋巴细胞瘤是一种常见的血液系统疾病，其发病率约为2／10000，按此估计，我国每年约有两万多病例。目前对B淋巴细胞瘤的治疗方法主要有化疗，放疗和生物辅助治疗三种疗法，生物治疗作为辅助疗法主要用于化疗替代、联合应用治疗、微量残留肿瘤细胞的杀伤和早期潜在转移灶的治疗，提高病人的愈后质量。CD₂₀是B淋巴细胞表面膜蛋白，CD₂₀与Ca²⁺离于在B淋巴细胞跨膜运输密切相关，CD₂₀对B淋巴细胞的分化和增殖起调节作用(BubienJK，Zhou LJ，Bell PD，et a1J．Cell Biol．1993，121(5)：1121-1132；Golay JT，Clark EA，Beverley PC，et alJ Immuno1．1985；135：3795)。CD₂₀作为治疗B淋巴细胞瘤靶点有如下优点：首先，CD₂₀只在前-B淋巴细胞，未成熟B淋巴细胞，成熟B淋巴细胞，激活B淋巴细胞表达，而在其他组织以及多能B淋巴干细胞，浆细胞不表达(Stashenko PNadler LM，Hardv R，et al．J．Immun，1980；125：1678-1685；Nadler LM，Karsmeyer SJ，Anderson KC，et alClin．Invest．1984；74：332-340；Stashenko PNadler LM，Hardy R，et al．Proc．Natl．Acad．Sci．USA 1981；78：3848-3852；Rosenthal P，Rimm IJ，Umiel T，et al．J．Immunol．1983；131：232-237)。其次，CD₂₀和抗CD₂₀抗体结合后不发生内吞作用，因而细胞表面CD₂₀数量并不因为抗体的结合而减少(Liu AY，Robinson RJr，Murvay ED，et al．J．Immunol．1987；139：3521)。第三，CD₂₀比较暴露，不为其它表面分子所掩盖，因而容易接近(Einleld DA，Brown JP，Vakebtube MA，et al．EMBOJ．1988；7：711)。第四，在人体血清中无游离的CD₂₀存在(EinleldDA，Brown JP，Valentine MA，et al．EMBOJ．1988；7：711)。

抗CD₂₀单克隆抗体的研究已有十多年的历史，早在80年代抗CD₂₀抗体IF5、B1已用于临床实验，但收效甚微，直至1997年才取得突破性的进展。是年美国FDA批准抗CD₂₀嵌合抗体Rituxan应用于B淋巴细胞瘤的临床治疗，疗效显著，毒副作用小(Magic bulletsat last：Finally-approval of a monoclonal antibody for the treatment ofcancer．Cancer Biotherapy & Radio pharmaceuticals 1997；14(4)：223-225)。不同的抗CD₂₀抗体和CD₂₀结合后引起的效应不同，有的可使B淋巴细胞从G₀期进入G₁期，引起B淋巴细胞的活化；有的抑制B淋巴细胞的活化。抗CD₂₀抗体主要是通过抗体依赖性细胞毒作用(ADDC)、补体依赖性细胞毒作用(CDDC)以及抗体和B淋巴细胞的结合等三种机制杀伤B淋巴细胞瘤。