[发明专利]一种新的多肽——人RNA解螺旋酶44和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人RNA解螺旋酶44，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在细胞的众多活动中，RNA结构的调控如：前体RNA的剪接、剪接体的装配、蛋白翻译等都是必需的调节步骤。这些过程通常由各种不同的RNA解螺旋酶来调节完成。RNA解螺旋酶为一很大的蛋白家族，在很多RNA起重要作用的生物系统中均可检测到。它们广泛地分布于从原核生物(包括病毒)到低等及高等生物的各组织器官中，参与细胞核及线粒体的分裂、RNA的编辑、rRNA的加工、转录起始、，细胞核mRNA的转运及mRNA的降解等过程。RNA解螺旋酶被认为是细胞发育及分化过程中的重要因子，其中的一些还在病毒单链RNA的转录及复制过程中起作用[Arri Eisen,John C.Lucchesi,Bioessays,1998,20:634-641]。其在生物体内为癌症、神经系统疾病及免疫系统疾病的诊断、预防及治疗提供了有效的手段。

RNA解螺旋酶根据其结构上的特征分为不同的亚家族，亚家族Ⅰ和亚家族Ⅱ。所有的解螺旋酶均含有两个Walker型NTP结合结构域---A结构域(或叫ATP酶A结构域)和B结构域(或称ATP酶B结构域)。亚家族Ⅰ中的成员含有保守的ATP酶A结构域：GXXXXGKT。后发现，有一些RNA解螺旋酶的ATP酶结构域A在一些氨基酸位点上有突变，其ATP酶A结构域的保守序列为：AXXGXGKT，因而将这些蛋白分为一类，即亚家族Ⅱ。在亚家族Ⅱ中，有部分蛋白在ATP酶结构域B中含有保守的DEAD盒，后发现该亚家族中的成员按其DEAD盒的不同又可分为三种不同的亚类，即DEAD盒蛋白、DEAH盒蛋白及DEXH盒蛋白[Angelika Luking,Ulf Stahl et al.,1998,Crit.Rev.Biochem.Mol.Biol.,33:259-296]。

研究发现，RNA解螺旋酶的不同的结构域在生物体内有着保守的功能。ATP酶结构域A为RNA解螺旋酶N末端的高度保守的结构域序列，其是RNA解螺旋酶与ATP结合的保守位点，是ATP结合所必需的；而ATP酶B结构域中保守的DEAD盒序列调节着ATP的水解与否。A结构域与B结构域在解螺旋酶中总是协同作用，ATP水解所释放的能量是RNA解螺旋酶发挥生物学功能所必需的。SAT区域是RNA解螺旋酶的又一重要保守区域，该区域氨基酸的突变将一致RNA解螺旋酶的活性。该酶C末端的HRIGRXXR保守序列对于RNA的结合与ATP的水解也是必需的[Angelika Luking,Ulf Stahl et al.,1998,Crit.Rev.Biochem.Mol.Biol.,33:259-296]。

本发明的新人RNA解螺旋酶44与已知的人解螺旋酶在蛋白水平上有41％的同一性和59％的相似性，并与其它的RNA解螺旋酶相似，含有N末端及C末端的高度保守的序列及各保守的基序。因而认为其与人RNA解螺旋酶相似，有相似的生物学特征。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人RNA解螺旋酶44以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人RNA解螺旋酶44的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人RNA解螺旋酶44的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人RNA解螺旋酶44的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人RNA解螺旋酶44的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人RNA解螺旋酶44的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人RNA解螺旋酶44异常相关的疾病的方法。

在本发明的第一方面，提供新颖的分离出的人RNA解螺旋酶44，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物、类似物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。