[发明专利]二硫键交联的糖蛋白激素类似物及其制备和应用

权利要求书

1.一种糖蛋白激素类似物，它选自人绒膜促性腺激素hCG、人促黄体素hLH、人促卵泡激素hFSH、人促甲状腺激素hTSH、以及它们的功能性突变蛋白，它具有α亚基和β亚基，其中所述糖蛋白激素亚基的氨基酸序列经过修饰在α亚基半胱氨酸和β亚基半胱氨酸之间产生一个亚基间二硫键来改善稳定性，这些半胱氨酸在所述糖蛋白激素的天然半胱氨酸残基位置的两个残基内、且不在对应的天然亚基的最外面的半胱氨酸单元外，所述类似物保留了针对对应的天然糖蛋白激素受体的至少一部分生物活性。

2.根据权利要求1所述的类似物，其中所述糖蛋白激素亚基的氨基酸序列经过修饰，在所述α亚基第2环内的半胱氨酸残基和所述β亚基第2环内的半胱氨酸残基之间产生一个亚基间二硫键。

3.根据权利要求1所述的类似物，其中所述糖蛋白激素亚基的氨基酸序列经过修饰，在所述α亚基C端的8个残基内的半胱氨酸残基与所述β亚基第2环内的半胱氨酸残基之间产生一个亚基间二硫键。

4.一种糖蛋白激素类似物，它选自人绒膜促性腺激素hCG、人促黄体素hLH、人促卵泡激素hFSH、人促甲状腺激素hTSH、以及它们的功能性突变蛋白，它具有α亚基和β亚基，其中所述糖蛋白激素亚基的氨基酸序列经过修饰在所述α亚基的半胱氨酸结节内的半胱氨酸残基与所述β亚基的半胱氨酸结节内的半胱氨酸残基之间产生一个亚基间二硫键，从而改善了稳定性，所述类似物保留了针对对应的天然糖蛋白激素受体的至少一部分活性。

5.根据权利要求4所述的类似物，其中所述亚基间二硫键在天然的半胱氨酸残基和被修饰成半胱氨酸残基的残基之间。

6.根据权利要求5所述的类似物，其中所述亚基间二硫键在所述α亚基的天然半胱氨酸残基与所述β亚基中被修饰成半胱氨酸残基的残基之间。

7.根据权利要求6所述的类似物，其中β亚基的氨基酸序列经过修饰，残基Tyr37被半胱氨酸取代，在所述α亚基的天然Cys31残基与所述β亚基中被修饰成半胱氨酸残基的残基37之间形成了一个亚基间二硫键。

8.根据权利要求7所述的类似物，它选自hCG的类似物、hLH的类似物及其功能性突变蛋白。

9.根据权利要求6所述的类似物，其中hFSH β亚基的氨基酸序列经过修饰残基Tyr31被半胱氨酸取代，在所述α亚基的天然Cys31残基和所述hFSH β亚基中被修饰成半胱氨酸残基的残基31之间形成一个亚基间二硫键。

10.根据权利要求6所述的类似物，其中hTSH β亚基的氨基酸序列经过修饰，Tyr30被半胱氨酸取代，在所述α亚基的天然Cys31残基和所述hTSH β亚基中被修饰成半胱氨酸残基的残基30之间形成一个亚基间二硫键。

11.一种糖蛋白激素类似物，它选自人绒膜促性腺激素hCG、人促黄体素hLH、人促卵泡激素hFSH、人促甲状腺激素hTSH、以及它们的功能性突变蛋白，它具有α亚基和β亚基，其中所述糖蛋白激素亚基的氨基酸序列经过修饰在所述α亚基环3和所述β亚基环2之间、或在所述α亚基环1和所述β亚基环2之间形成一个亚基间二硫键来改善稳定性，所述类似物保留了针对对应的天然糖蛋白激素受体的至少一部分生物活性。

12.根据权利要求11所述的类似物，其中所述α亚基的氨基酸序列经过修饰，Val76被半胱氨酸取代，所述hFSH β亚基经修饰，Val38被半胱氨酸取代，从而在所述α亚基的残基76和所述hFSH β亚基的残基38之间产生一个亚基间二硫键。

13.一种药物组合物，它包含有效量的权利要求1-12任一所述的类似物以及药学上可接受的赋形剂。

14.根据权利要求13所述的药物组合物，它是一种液体。

15.根据权利要求14所述的药物组合物，它是稳定的。

16.一种治疗不育症的方法，该方法包括将权利要求13所述的药物组合物给予需要它的患者。

17.一种限制生育力的方法，该方法包括将权利要求13所述的药物组合物给予需要它的患者。

18.一种重组DNA分子，它包含编码权利要求1-12任一所述的类似物α亚基的核苷酸序列。