[发明专利]肝细胞癌的预防及治疗

说明书

                与相关申请的前后对照

本申请是共同未决的美国专利申请系列号60/038,375的部分继续申请，后者题为“用于预防及治疗肝细胞癌的方法和组合物”并于1997年2月13日提出申请。

                     发明本底

原发性肝癌是全世界癌症死亡的主要原因之一。肝细胞癌(HCC)是原发性肝癌的最常见类型，每年约发生120万例。在世界上某些地区，如东南亚和南非，肝细胞癌是恶性肿瘤中最常见的类型之一。在这些地区，这类疾病的高频出现似乎与肝炎的高发生率有关。

对肝细胞癌的可愈性疗法目前限于非转移性疾病的个体，包括外科手术切除肿瘤并进行或不进行肝移植。然而，即使是手术切除和移植也不能治愈大多数肿瘤，因为切除术后又有复发。直到今天，治疗中的化疗方法一直很不见效。过去二十多年来对肝细胞癌的治疗未取得任何有意义的进展。

故，仍需要寻求一种针对肝细胞癌的有效治疗方法。这种治疗方法最好应适用于这种病的发生率很高的不发达国家。而且，这种治疗方法应适用于具有不可手术切除的肿瘤及患有转移性疾病的患者。

                      发明简述

依据本发明的一个实施方案，提供了可用于预防或治疗哺乳动物(包括人)体内的诸如肝细胞癌这样的癌症的方法，这种方法所含步骤包括在哺乳动物体内产生针对甲胎蛋白分子的至少一部分氨基酸序列的免疫应答。

产生免疫应答之步骤可包括给予哺乳动物至少一种组合物，其中含有的一种肽包含甲胎蛋白的至少部分氨基酸序列；或给予至少一种组合物，其中含有的一种肽包含甲胎蛋白的至少部分氨基酸序列并有至少一个氨基酸被替代。产生免疫应答之步骤亦可包括给予哺乳动物至少一种组合物，其中包含甲胎蛋白分子的至少部分cDNA序列。更进一步，产生免疫应答之步骤可包括给予哺乳动物至少一种组合物，其中含有转导了可表达甲胎蛋白cDNA的某种重组载体的免疫系统细胞。

依据本发明的另一个实施方案，提供了用于免疫接种人体以预防或治疗癌症的一种组合物。该组合物中含有选自下述成员的一种肽：AFP5、AFP7、AFP13、AFP14、AFP18、AFP22、AFP23、AFP28、AFP38、AFP39、AFP45、AFP49、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3。

                     发明图示

参照以下描述、所附权利要求书及附图，将能更好地理解本发明的诸多特点、各个方面及优势：

图1是显示用人AFP49肽产生的CTL细胞相对细胞毒性的条形图；

图2示针对肽靶和AFP靶检测的CTL标准铬释放试验所得特异性裂解率对靶细胞之条形图，其中CTL由来自一位正常的HLA A2.1供体、经肽刺激的PBMC产生；

图3为用BWIC3-一种mAFP阳性的鼠肿瘤细胞系-对经鼠AFPcDNA免疫接种过的小鼠(图中以空心盒表示)及未免疫的小鼠(图中以实心方形表示)进行肿瘤激发后，平均肿瘤大小对激发后天数的曲线；

图4为用EL4(亲代)-一种不产生mAFP的鼠肿瘤细胞系-对经鼠AFP cDNA免疫接种过的小鼠(空心盒)及未免疫的小鼠(实心圆)进行肿瘤激发后，平均肿瘤大小对激发后天数的曲线；

图5为用EL4(AFP)-一种能产生mAFP的鼠肿瘤细胞系-对经鼠AFP cDNA免疫接种过的小鼠(空心盒)及未免疫的小鼠(实心圆)进行肿瘤激发后，平均肿瘤大小对激发后天数的曲线；

图6为用稳定转染有AFP表达载体的FSA C3H本底纤维肉瘤细胞或稳定转染有仅表达neo之载体的FSA C3H本底纤维肉瘤细胞平均肿瘤直径对对免疫接种了小鼠AFP-AdV穿梭载体带neo表达质粒的质粒DNA(实心圆，较低实心方形，实心菱形)的小鼠，和未经免疫的小鼠(较高实心方形，实心倒三角形)进行肿瘤攻击后，平均肿瘤直径对激发后天数的曲线；

图7为用BWIC3肿瘤对经能合成小鼠AFP基因的质粒载体免疫接种过的小鼠(实心圆)和未免疫接种过的小鼠(实心方形)进行肿瘤激发后，平均肿瘤直径对激发后天数的曲线；

图8为用BWIC3肿瘤对经能合成小鼠AFP基因的质粒载体免疫接种过的小鼠(实心三角，实心菱形，实心倒三角)和未免疫接种过的小鼠(实心圆和实心方形)进行肿瘤激发后，平均肿瘤直径对激发后天数的曲线；