[发明专利]治疗血管疾病的方法

说明书

发明领域

本发明涉及医学科学，特别是用活化的蛋白C治疗血管疾病。

发明背景

蛋白C是一种丝氨酸蛋白酶和天然的抗凝剂，它通过在凝血级联中灭活因子Va和VIIIa从而在体内平衡的调节中扮演重要角色。人蛋白C主要在肝脏进行体内合成，形式为461个氨基酸组成的单个多肽。此前体分子进行多步翻译后修饰，包括1)将含42个氨基酸的信号序列裂解；2)由单链酶原的155位蛋白水解除去赖氨酸残基，在156位上蛋白水解除去精氨酸残基，制备双链形式的分子(即155个氨基酸残基的轻链通过二硫桥连接在含丝氨酸蛋白酶的262个氨基酸残基组成的重链上)；3)对簇聚在轻链的头42个氨基酸中的9个谷氨酸残基进行维生素K依赖性的羧基化，得到9个γ-羧基谷氨酸残基；及4)在四个位点(一个在轻链中，三个在重链中)连接碳水化合物。该重链含有构建良好的，Asp 257、His 211和Ser 360的丝氨酸蛋白酶三联体。最后，在钙离子的存在下，此循环的双链酶原被磷脂表面上的凝血酶体内活化。除去重链N末端的十二肽导致活化，产生具有酶活性的活化蛋白C(aPC)。

与其它蛋白质相联系，蛋白C可能作为最重要的凝血负调节物。换言之，蛋白C酶系统代表了抗凝的主要生理机制。

凝血系统最好看作链反应，其中酶原连续活化为活性丝氨酸蛋白酶，最后产生酶：凝血酶，该酶通过有限的蛋白水解将血浆纤维蛋白原转变为不溶性胶：纤维蛋白。凝血级联中的两个关键为通过凝血因子IXa将凝血因子X转变为Xa，以及通过凝血因子Xa将凝血酶原转变为凝血酶。这两个反应都发生在细胞表面，尤其是在血小板表面。这两个反应都需要辅因子。主要的辅因子因子V和因子VIII以相对无活性的前体形式在该系统中循环，但是当头几个凝血酶分子形成时，凝血酶循环回来并通过有限的蛋白水解活化这些辅因子。这些活化的辅因子Va和VIIIa通过约五个数量级放大加速凝血酶原向凝血酶及因子X向因子Xa的转化。活化的蛋白C绝大多数情况下优选两种血浆蛋白底物，对其进行水解和不可逆的破坏。这些血浆蛋白底物为凝血因子Va和VIIIa的活化形式。活化的蛋白C只最小程度地降解无活性的前体，凝血因子V和VIII。在狗体内，已表明活化的蛋白C极剧增加主要生理纤维蛋白分解酶、组织纤溶酶原激活物(tPA)的循环浓度。体外试验表明活化的蛋白C提高人全血中纤维蛋白的溶解。因此，活化的蛋白C代表了人体内纤维蛋白溶解的重要助手。

今天，对血管梗塞包括栓塞性中风的有效治疗手段很少。用tPA 治疗，如果在中风发作3小时内使用，最近已得到FDA的同意。用肝素或口服抗凝剂治疗中风，虽然偶尔有利，但是要冒血液流进梗塞的脑部的高度风险。

Griffin等在美国专利5084274中提出用重组aPC(r-aPC)治疗狒狒模型的血管梗塞或血栓栓塞。Griffin要求保护的治疗栓塞性梗塞的剂量水平为0.2mg/kg/小时至1.1mg/kg/小时。但是，申请人发现这些剂量水平显著地超出了r-aPC的生理毒性范围。例如，对非人类灵长类动物的预临床毒理学研究表明r-aPC进行96小时输液的安全值限制在最高剂量为0.05mg/kg/小时左右。因此，Griffin等教导的最低剂量即0.2mg/kg/小时是申请人为人类建立的毒性剂量的4倍。因此，即使是Griffin教导的最低剂量也要冒血液流进梗塞的脑部的高度风险，于是恶化了中风伴发的神经性疾病。因此，即使基于Griffin等的教导，也存在确定用aPC治疗人动脉血栓形成的有效治疗方法的需求。

与上述研究者的教导相反，本申请人发现仅需r-aPC的低剂量治疗即可用于治疗栓塞性休克。aPC的给药有利于预防微血管和大血管梗塞性动脉血栓的局部扩展，降低中风导致的神经疾病。

发明概述

本发明提出了一种对患有血管梗塞和动脉血栓栓塞疾病的病人进行治疗的方法，该方法包括给所述患者使用剂量为约0.01mg/kg/小时至约0.05mg/kg/小时的活化的蛋白C。

本发明还提供了适于连续输液给药的单位剂型，其中含有单位剂量容器，该容器中含有约5mg至约20mg的活化的蛋白C，其适于剂量约0.01mg/kg/小时至约0.05mg/kg/小时的给药。

发明详述

正如本文公开和要求保护的，为了本发明的目的，将下列术语限定如下。