[发明专利]一种耐热的内切－β－1,4－葡聚糖酶

权利要求书

1.一种有内切-β-1，4-葡聚糖酶活性的酶制剂，它在高于90℃的温度下有最佳活性。

2.权利要求1的制剂，其中所述酶制剂可得自属于古生物的一个菌株，或是它的内源物。

3.权利要求1或2的制剂，其中所述酶制剂可得自Euryarchaeota门的一个菌株，或是它的内源物。

4.权利要求3的制剂，其中所述菌株属于热球菌亚门。

5.权利要求4的制剂，其中所述菌株属于热球菌属，优选属于激烈热球菌，特别是属于激烈热球菌DSM3638。

6.权利要求1至5中任何一项的制剂，它在约pH4-11有活性，优选在大约pH5.5-10有活性。

7.权利要求1至6中任何一项的制剂，其基本上由一种酶组成，所述酶有内切-β-1，4-葡聚糖酶活性，且属于糖基水解酶第12家族。

8.一种DNA构建体，它含有编码有内切-β-1，4-葡聚糖酶活性的一种酶的一段DNA序列，该酶最佳活性在90℃以上，优选在95℃以上，更优选在100℃以上，所述DNA序列含有

a)相应于SEQ ID NO：1的DNA序列或者可得自大肠杆菌DSM11203内质粒的DNA序列中内切-β-1，4-葡聚糖酶编码部分的DNA序列，或者

b)相应于SEQ ID NO：1的DNA序列或者可得自大肠杆菌DSM11203内质粒的DNA序列中内切-β-1，4-葡聚糖酶编码部分的DNA序列的相似物，该相似物

i)与相应于SEQ ID NO：1 DNA序列或者可得自大肠杆菌DSM11203内质粒的DNA序列中内切-β-1，4-葡聚糖酶编码部分的DNA序列同源，优选至少40％同源，或

ii)与相应于SEQ ID NO：1 DNA序列或者可得自大肠杆菌DSM11203内质粒的DNA序列中内切-β-1，4-葡聚糖酶编码部分的DNA序列可杂交，或者

iii)编码一种多肽，该多肽与SEQ ID NO：2所示的多肽或者由一种DNA序列编码的多肽同源，优选至少45％同源，所述DNA序列包含相应于SEQ ID NO：1 DNA序列或者可得自大肠杆菌DSM11203内质粒的DNA序列中内切-β-1，4-葡聚糖酶编码部分的DNA序列，或者

iv)编码一种多肽，该多肽与针对纯化的内切-β-1，4-葡聚糖酶产生的抗体具有免疫反应性，所述内切-β-1，4-葡聚糖酶是由相应于SEQ IDNO：1的DNA序列或者可得自大肠杆菌DSM11203内质粒的DNA序列中内切-β-1，4-葡聚糖酶编码部分的DNA序列编码的。

9.权利要求8的DNA构建体，其中所述DNA序列分离自一种古生物，或者是在一种古生物的DNA文库基础上产生的。

10.权利要求9的DNA构建体，其中的DNA序列分离自一个菌株，或者是在一个菌株的DNA文库基础上产生的，该菌株属于Euryarchaeota门，优选属于热球菌亚门，更优选属于热球菌属，甚至更优选属于激烈热球菌种，尤其是激烈热球菌DSM3638。

11.权利要求8-10中任何一项的DNA构建体，其中所述DNA序列分离自大肠杆菌DSM11203。

12.权利要求8-11中任何一项的DNA构建体，其中还含有编码纤维素结合结构域(CBD)的DNA序列。

13.权利要求12的DNA构建体，其中还含有编码纤维素结合结构域(CBD)的DNA序列，该纤维素结合结构域和由该DNA构建体之DNA序列所编码的酶的酶核心(催化活性结构域)被可操纵地连接在一起。

14.一种含有权利要求8-13中任何一项的DNA构建体的重组表达载体。

15.一种含有权利要求8-13中任何一项的DNA构建体或权利要求14的重组表达载体的细胞。

16.权利要求15的细胞，它是原核细胞，特别是细菌细胞；或者是真核细胞，特别是丝状真菌细胞；或者是编码具有内切-β-1，4-葡聚糖酶活性之酶的DNA序列最初来源的内源细胞。