[发明专利]新的人纺锤素蛋白及其编码序列,及制法和用途

说明书

本发明涉及一种新的多核苷酸，由该多核苷酸编码的多肽，这些多核苷酸和多肽的应用，以及所述多核苷酸和所述多肽的生产。更具体地说，本发明的多肽被推断鉴定为纺锤素蛋白(Spindlin，简称Spin)家族中的一个新成员。

纺锤素蛋白是小鼠中发现的一种蛋白，它在卵母细胞与早期胚胎细胞中高表达。最近，有报道表明，其在人的卵母细胞与早期胚胎细胞中也有表达。

纺锤素蛋白基因最早是由Bermseok O.等人于1997年从小鼠中发现，并从小鼠胚胎cDNA文库中克隆得到的(Bermseok Oh.Development 1997，124，493-503)。1998年，HeathP.等人声称从人中也克隆得到了一种纺锤素蛋白的cDNA序列及其所编码的多肽序列(文献尚未发表)。

但在本申请之前，没有公开或发表过其他的与本发明的纺锤素蛋白相同或相似的人纺锤素蛋白或基因。

本发明的一个目的是提供一种新的多核苷酸，该多核苷酸编码神经内分泌蛋白基因家族的一个新成员，本发明新的人纺锤素蛋白基因，被命名为HSPIN基因。

本发明的另一个目的是提供一种新的纺锤素蛋白家族成员，该蛋白被命名为HSPIN蛋白。

本发明的再一个目的是提供一种利用重组技术生产所述的新的人纺锤素蛋白HSPIN的方法。

本发明还涉及这种人纺锤素蛋白HSPIN核酸序列和多肽的应用。

在本发明的一个方面，提供了一种分离出的DNA分子，它包括：编码具有人HSPIN蛋白活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.3中从核苷酸124-912位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在中度严紧条件下与SEQ ID NO.3中从核苷酸124-912位的核苷酸序列杂交。较佳地，所述的序列编码一多肽，该多肽具有SEQ ID NO.4所示的序列。更佳地，该序列具有SEQ ID NO.3中从核苷酸124-912位的核苷酸序列。

在本发明的另一方面，提供了一种分离的人HSPIN蛋白多肽，它包括：具有SEQ ID NO.4氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段，或其活性衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO.4序列的多肽。

在本发明的另一方面，提供了一种载体，它含有上述分离出的DNA。

在本发明的另一方面，提供了一种所述载体转化的宿主细胞。

在本发明的另一方面，提供了一种产生具有人HSPIN蛋白活性的多肽的方法，该方法包括：

(a)将编码具有人HSPIN蛋白活性的多肽的核苷酸序列可操作地连于表达调控序列，形成人HSPIN蛋白表达载体，所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.3中从核苷酸124-912位的核苷酸序列有至少70％的同源性；

(b)将步骤(a)中的表达载体转入宿主细胞，形成人HSPIN蛋白的重组细胞；

(c)在适合表达人HSPIN蛋白多肽的条件下，培养步骤(b)中的重组细胞；

(d)分离出具有人HSPIN蛋白活性的多肽。

在本发明的一个具体实施方案中，本发明的分离的多核苷酸全长为934个核苷酸，其详细序列见SEQ ID NO.3，其中开放读框位于124-912位核苷酸。

在本发明中，“分离的”、“纯化的”或“基本纯的”DNA是指，该DNA或片段已从天然状态下位于其两侧的序列中分离出来，还指该DNA或片段已经与天然状态下伴随核酸的组份分开，而且已经与在细胞中伴随其的蛋白质分开。

在本发明中，术语“HSPIN蛋白(或多肽)编码序列”指编码具有人HSPIN蛋白活性的多肽的核苷酸序列，如SEQ ID NO.3中124-912位核苷酸序列及其简并序列。该简并序列是指，位于SEQ ID NO.3序列的编码框124-912位核苷酸中，有一个或多个密码子被编码相同氨基酸的简并密码子所取代后而产生的序列。由于密码子的简并性，所以与SEQ ID NO.3中124-912位核苷酸序列同源性低至约70％的简并序列也能编码出SEQ ID NO.4所述的序列。该术语还包括能在中度严紧条件下，较佳地在高度严紧条件下，与SEQ ID NO.3中从核苷酸124-912位的核苷酸序列杂交的核苷酸序列。此外，该术语还包括与SEQ ID NO.3中从核苷酸124-912位的核苷酸序列的同源性至少70％，较佳地至少80％，更佳地至少90％的核苷酸序列。