[发明专利]一种皮肤保存液

说明书

本发明属于人或动物体或其局部的保存技术领域，特别涉及一种快速冷冻深低温人体皮肤储存用皮肤保存液。

目前国内外用于储存人体皮肤的方法有超低温皮肤保存法和慢冷冻皮肤保存法，前者是将加工好的皮肤经二甲亚砜处理后，保存于超低温冰箱(-80℃)或CO₂干冰中；后者则是把加工好的人体皮肤经二甲亚砜处理后，储存于超低温冰箱或CO₂干冰中，以1-3℃/min的速度降温至-72℃,12小时后再储存到-196℃液氮中保存。上述两种方法用于人体皮肤保存存在的问题主要是皮肤保存液抗冻性差、渗透性差、皮肤细胞抗冻性不均匀，且在储存过程中皮肤细胞内外结晶速度不一致，导致冷冻过程中对皮肤细胞的损伤。结果经储存的皮肤活力低、移植后成活率低，且用这两种方法保存的皮肤保存时间短、操作繁琐、费时费力，需设备多、造价高。

本发明的目的在于提供一种保存皮肤效果好的皮肤保存液。

为达上述目的，本发明采用如下技术方案：一种皮肤保存液，含有平衡液、二甲亚砜、抗冻剂，还含有高效渗透剂，其中按体积计二甲亚砜为10-20％，抗冻剂为0.5-20％，高效渗透剂为0.5-10％。

二甲亚砜为15-20％，抗冻剂为5-10％，高效渗透剂为0.5-5％。

抗冻剂为1,2-丙二醇、1,3-丙二醇、丙三醇之一或两种或三种的混合物，高效渗透剂为氮酮。

还含有微量的月桂醇硫酸钠等阴离子表面活性剂。

本发明皮肤保存液的一种制作方法为：将二甲亚砜、抗冻剂和高效渗透剂(等)充分混合均匀后加入平衡液中混匀，调PH=6.8-7.8，平衡液为医学上常用之平衡液，如下列组成的平衡液：氯化钠0.52克、氯化钾0.027克、氯化钙0.021克、硫酸镁0.022克、磷酸氢二钠0.414克、1N盐酸0.23ml，混合加蒸馏水至100ml。

使用本发明储存皮块，首先把符合要求的人体皮肤在无菌条件下加工成0.35-0.6mm厚的皮块，浸于0-4℃温度下的本发明皮肤保存液中，浸泡20-40分钟，裁成750-2500CM²大小，入无菌塑料袋、封口，装入储皮槽、投入液氮保存。需要使用皮肤时，把装有皮块的塑料袋置40℃水溶液中水浴振荡或旋流复温3分钟，抗菌药物浸泡10分钟即可。

本发明充分考虑到二甲亚砜的毒性及刺激性气味，采用了10-20％(V/V)的适宜浓度；在皮肤保存液中加入丙二醇、丙三醇等抗冻剂，提高皮肤抗冻性；采用高效无毒的渗透剂如氮酮(1-十二烷基氮杂环庚酮-2)，大大提高了保存液的渗透速度。使保存液能迅速均匀地渗透至皮肤细胞内外，冷冻储存过程中由于细胞内外结晶速度均匀一致，最大限度地避免了冷冻和复温过程对皮肤细胞的损伤，使皮肤保存时间延长。慢冷冻法或-80℃低温冰箱保存法保存皮肤的时间一般在6个月至一年，过长时间则皮肤活力大为下降，而本发明保存液处理后的皮肤可长期在液氮中储存，在我们临床应用中，储存3年后的皮肤移植成活率仍很高，利用本领域通用的生物氧耗皮肤活力测定仪(DBM-Ⅰ型、北京304医院产)用琥珀酸脱氢酶测定法对储存后皮块活力进行测定表明，较慢冷冻或-80℃冰箱保存法，本发明保存液处理后皮肤储存后活力明显高于前者，提高25-37.1％，达90％以上。储存的皮肤移植成活率高，达96％以上。另外采用本发明保存液处理后的皮肤，进行冷冻处理速度快、方法简单、省时、省力、省设备。

截止目前，我们用此方法保存皮肤达86万CM²之多，广泛应用到郑州、安阳、濮阳、许昌、焦作等地，应用到总面积100％三度90％大面积烧伤，速冻异体皮完全成活。本发明为无数大面积深度烧伤的成功抢救打下了基础，为大面积烧伤患者带来了福音。

下面通过实施例进一步说明本发明：

实施例1、2、3、4、5、6中各组份配比见下表，其制作方法为：配制平衡液，把氯化钠0.52克、氯化钾0.027克、氯化钙0.021克、硫酸镁0.022克，磷酸氢二钠0.414克，1N盐酸0.23ml混合后加蒸馏水至100ml，高压灭菌，取二甲亚砜、抗冻液、高效渗透剂(等)混合，加入冷却后的平衡液中，调PH至6.8-7.8。

    实施例成份(V/V％)    1    2    3    4    5    6  二甲亚砜    10    10    15    15    15    20 1,2-丙二醇    5    10    0    0    5    0 1,3-丙二醇    0    0    5    10    0    10    丙三醇    5    0    0    5    5    10    氮酮    6    5    5    1    2    0.5   平衡液  余量  余量  余量   余量  余量   余量