[发明专利]聚氧乙烯脱水山梨醇酐单油酸酯作为制备温热治疗肿瘤增敏药的用途及其制法

说明书

本发明揭示一种有增强温热治疗肿瘤作用的增敏药——聚氧乙烯脱水山梨醇酐单油酸酯(即吐温80)的用途及其制法，涉及药品的制备方法。

温热疗法具有选择性抗肿瘤作用，其作用的独特性以及与其它疗法如化学疗法、放射疗法间的互补性和协同性，使之成为现代肿瘤治疗的重要手段之一。临床上，温热常与化疗药物合并治疗多种肿瘤，包括浅表、深部、原发或继发性肿瘤，取得良好疗效，逐步形成了温热化学疗法这一新领域。但是，温热治疗肿瘤达到疗效所需的临界温度范围较高(42.5～43℃)，合并化疗所用抗癌药物毒性反应通常较大，这些不足之处不同程度地影响了温热化学疗法的应用及其推广。因此，寻找理想的温热协同药物，降低温热临界温度，提高疗效，减少副作用，是促进该疗法推广应用的关键。国际上公认的理想的温热协同药物应是常温下无明显细胞毒性，而在39～42℃范围内能明显选择性杀伤肿瘤细胞的药物。

已有技术中聚氧乙烯脱水山梨醇酐单油酸脂(即吐温80)，在美国药典法定名为“polysorbas”，是山梨醇的一次和二次脱水产物，结构式为：

由于分子中有亲水性聚氧乙烯基H(G₂H₄O)nO^-大大增加了亲水性，因而是非离子型水溶性表面活性剂。被列为无公害或低公害附加剂。近年来广泛应用在医学、日化和食品工业，医药中作为注射剂及其他剂型中的增溶、乳化剂、分散剂，也可以作为药用辅料。(中华人民共和国药典，一九九五年版二部，P1039-1040，化学工业出版社和药剂学，一九六五年二月第一版，P78-81，人民卫生出版社)。这类表面活性剂口服相对无毒性，每天口服6克连续24天、有的服用达4年之久都没有任何不良反应。其半数致死量口服可达25g/kg、静脉给药为5800mg/kg。注射后的溶血作用小于其他助溶剂，0.1％的浓度无论在体内或体外试验均不引起溶血。文献报道上海大众制药厂的产品在浓度为0.2％时也不产生溶血，肌肉注射产生溶血作用的最大剂量比静脉注射量大10倍，因而是一种安全、常用的药物。

本发明目的在于提出一类新型理想温热协同增敏药物，增强温热抗肿瘤效应，降低温热治疗肿瘤的临界温度，能在39℃～41℃温热时即产生明显的协同抗肿瘤效应及其制备方法。

本发明的目的是通过下述技术方案来实现的：

在常温下吐温80几乎无毒性，可从静脉给药，使吐温80具有增强温热杀伤肿瘤细胞的效应，降低温热作用的临界温度，抑制肿瘤热耐受性产生，与温热协同在39℃～41℃即能显著抑制肿瘤生长与转移，对正常细胞无明显影响，这与已知吐温80的助溶剂作用不同，和已知的抗癌药物与温热协同作用也不同，从而可以用来制备作为局部和全身温热治疗肿瘤增敏药物，用于肿瘤的治疗。

吐温80作为温热治疗肿瘤增敏药的制备方法，其技术特征在于：

a．将吐温80溶解于0.8～0.9％NaCl溶液中，配制成5～10％(重量/体积)浓度；

b．再加CaCl₂(1.0～1.5mM)、KCl(5.0～5.5mM)、MgSO₄(0.5～0.8mM)及葡萄糖(1～5％)，用Na₂HPO₄/KH₂PO₄调节pH至7.2～7.4；

c．经0.45μm微孔滤膜过滤，8磅10分钟高压灭菌，待冷却并使其完全溶解。

本发明的技术方案，通过实验研究结果如下：一．细胞学研究：1．细胞培养：肿瘤细胞：人胃癌细胞系(BGC-823)；

     正常细胞：选用人胚肺成纤维细胞、人包皮成纤维细胞或正常

         人红细胞。2．实验分组：随机分成以下各组

吐温80合并温热组(合并组)：接种细胞培养后24小时加吐温80，最终剂量为0.1％(重量/体积)。吐温80作用24小时，于作用结束前，分别在高精度水浴箱中进行39℃、41℃、43℃(±0.1℃)，作用20、60、100分钟的温热处理。换新培养液继续培养。

加温组：加等容量的平衡液(Hanks)，加温条件同合并组。

吐温组：加吐温80条件同合并组，37℃中培养。

平衡液(Hanks)组：加等容量的平衡液，37℃常温培养。

丝裂霉索C(MMC)组：方法和条件与上述各组一致，丝裂霉素C最终浓度为0.05μg/ml。

正常细胞组：方法和条件与上述各组一致。3．观察指标：