[发明专利]调节体重的化合物的筛选方法

说明书

                   1．引言

本发明阐述用于处理如肥胖、厌食及恶病质等体重失调的药物筛选方法、和诊断及治疗方法，这些方法涉及黑素皮质素(melanocortin)受体(MC4-R)。本发明也阐述调节MC4-R活性或表达的化合物，和上述化合物在治疗体重失调中的应用。

                    2．发明背景

已知黑素皮质素(来源于阿黑皮素原(pro-opiomelanocortin)翻译后加工的各种不同的肽产物)具有系列广泛的生理作用。除了众所周知的对肾上腺皮质功能(如通过ACTH，促肾上腺皮质激素)和对黑色素细胞(如通过α-MSH，促黑素细胞激素)作用外，黑素皮质素表现为影响行为、学习和记忆、心血管系统的控制、痛觉缺失、体温调节以及包括催乳激素、黄体激素和生物产生的胺类的其他神经体液因子的释放。从外周作用来看，黑素皮质素被确认为具有免疫调节作用和神经营养特性，参与分娩有关的各种事件。

黑素皮质素通过黑素皮质素受体(MC-R)介导效应，该受体为G-蛋白偶联受体亚族。除了MC1-R被确认为对α-MSH特异和MC2-R被确认为对ACTH特异外，迄今为止克隆和确认的黑素皮质素受体(MC3-R、MC4-R、MC5-R)被认作“弧儿”受体，即针对每一受体的天然配基的特性仍未被确定，每种类型受体的生理功能仍然未知。

野灰色蛋白是一种在小鼠中表达的基因产物，已知它涉及决定皮毛的颜色，但当其正常的表达类型脱调节，蛋白到处表达时，也认为野灰色蛋白在肥胖中起作用。然而，野灰色蛋白的受体一直来未被确定或被克隆，已知观察到野灰色蛋白拮抗由MSH诱导的2种黑素皮质素受体的活化。

                2.1黑素皮质素受体

2种首先被克隆的黑素皮质素受体是黑色素细胞MSH受体，MC1-R和肾上腺皮质ACTH受体，MC2-R、(Moutioy等，1992,科学257:1248-1251；Chtajlani和Wikberg,1992,FEBS Lett.309:417-420)。接着，克隆到3种另外的黑素皮质素受体基因，这些基因能识别黑素皮质素核心七肽序列(MEHFRWG)。这些受体中的2种，MC3-R(Roselli-Rehfuss等，1993，美国国家科学院院报90:8856-8860；Gantz等，1993，生物化学杂志268:8246-8250)和MC4-R(Gantg等，1993，生物化学杂志268:15174-15179；Mountjoy等，1994,Mol.Endo.8:1298-1308)，已表明主要在脑中表达。第五种黑素皮质素受体(最初称为MC2-R)在许多外周器官及脑中表达(Chhajlani等，1993，生物化学生物物理研究通讯195:866-873；Gantz等，1994，生物化学生物物理研究通讯200:1214-1220)。后3种受体的天然配基和功能仍然未知。

因为它们作为受体却没有确定的配基的“孤儿”状态，和缺乏任何已知的针对这些新受体的生理作用，研究者们企图通过它们对各种已知的黑素皮质素(如见Roselli-Rehfuss,1993同上；和Gantz,1993同上)或来源于MSH和ACTH氨基酸序列的激动剂和拮抗剂(如，见Hruby等，1995，医学化学杂志38:3454-3461；和Adan等，1994，欧洲药理学杂志269:331-337)的结合和反应能力(例如，转导信号)，体外描述受体的特性。在另一种方法中，黑素皮质素受体家族的成员，作为一种假定功能的工具，根据它们的组织分布类型加以划分(如，见Gantz,1993，同上；和Mountjoy,1994，同上)。例如，MC1-R的表达被定位在黑色素细胞中，MC2-R被定位在肾上腺皮质细胞中，而MC3-R和MC4-R主要在脑中但不在肾上腺皮质或黑色素细胞中找到，MC4-R不在胎盘中表达，胎盘是大量表达MC3-R的组织。根据在脑海马区表达类型，提出了MC4-R在学习和记忆中的作用(Gantz,1993，同上)，但注意到了“药理学上自相矛盾的现象”，MC4-R对学习行为的保持有影响的已知化合物没有良好地反应(Mountjoy,1994，同上)。Mountjoy 1994进一步建议MC4-R可能参与对视觉和感觉信息流或躯体动作控制的协调方面的调节，和/或可能参与对心脏的自主性流出的调节。

因此，尽管上述的努力，MC3-R、MC4-R和MC5-R的天然配基和功能仍然难以捉摸。

              2.2野灰色蛋白