[发明专利]氨基醇及其衍生物的制备方法

权利要求书

1．微生物以及从中提取的酶，其特征在于该微生物能够利用选自以下通式化合物的环戊烯衍生物作为唯一的碳源、或唯一的氮源、或唯一的碳源和氮源，其中R¹表示C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、芳基或芳氧基。

2．根据权利要求1所述的微生物和提取物，其中的微生物选自、红球菌属、戈登氏菌属、节细菌属、产碱杆菌属、土壤杆菌/根瘤菌属、芽孢杆菌属、假单孢菌属或产碱杆菌属/博德特氏菌属。

3．根据权利要求1所述的微生物和提取物，其中的微生物选自以下菌株：具体的种是产碱杆菌/博德特氏菌FB188(DSM11172)、erythropolis红球菌CB101(DSM10686)、HSZ5种节细菌(DSM10328)、FB387种红球菌(DSM11291)、xylosoxydans产碱杆菌反硝化HSZ17亚种(DSM10329)、土壤杆菌/根瘤菌HSZ30、单纯芽孢杆菌K2、恶臭假单孢菌K32或CB100种戈登氏菌(DSM10687)，以及与它们功能相当的变异株和突变株。

4．具有N-乙酰氨基-醇水解酶活性的酶以及与它们功能相当的变异体和突变体，来自权利要求1至3中任一项所述的微生物，它们能够水解选自以下通式化合物的环戊烯衍生物其中，R¹表示C₁-C₄烷基，C₁-C₄烷氧基，芳基或芳氧基。

5．根据权利要求4所述的酶以及与它们功能相当的变异体和突变体，其特征在于，

a)最适pH为7.0±1.0；

b)pH7.0时的最适温度为25至30℃之间；

c)对底物1-乙酰氨基-4-羟甲基-2-环戊烯的K_M是22.5+7.5mM(30℃,100mM磷酸盐缓冲液)。

6．根据权利要求4或5所述的酶及与它们功能相当的变异体和突变体，其特征还在于：

d)N末端的氨基酸序列为Thr-Glu-Gln-Asn-Leu-His-Trp-Leu-Ser-Ala-Thr-Glu-Met-Ala-Ala-Ser-Val-Ala-Ser-Asn；

e)经SDS-PAGE测定的分子量为50kD。

7．制备以下物质的方法：通式Ⅰ和Ⅱ的(1R,4S)-和/或(1S,4R)-1-氨基-4-(羟-甲基)-2-环戊烯和/或通式Ⅲ和Ⅳ的(1S,4R)-和/或(1R,4S)-氨基醇衍生物：其中R¹表示C₁-C₄烷基，C₁-C₄烷氧基，芳基或芳氧基，该方法包括：借助权利要求1所述的微生物、酶、或借助权利要求4所述的酶、和/或青霉素G酰基转移酶将通式Ⅶ的环戊烯衍生物，其中R¹如前所述转化成通式Ⅰ和/或Ⅱ的化合物，并适当分离该转化产生的上述化合物、和/或产生的通式Ⅲ和/或Ⅵ的氨基醇衍生物。

8．根据权利要求7所述的方法，其特征在于，通式Ⅶ的环戊烯衍生物，其中的R¹如前所述的制备方法如下：

第一步，酰化通式Ⅴ(±)-2-氮杂双环[2.2.1]庚-5-烯-3-酮，得到通式Ⅵ(±)-2-氮杂双环[2.2.1]庚-5-烯-3-酮的衍生物其中R¹如前所述，第二步，将此化合物还原成通式Ⅶ的环戊烯衍生物。

9．根据权利要求8所述的方法，其特征在于第一步的酰化是用通式Ⅶ的羰基卤化物进行的其中的X表示卤原子，R¹如前所述，或者用通式Ⅸ的羧酸酐进行其中R¹如前所述。

10．根据权利要求8或9所述的方法，其特征在于第一步的酰化是在非质子传递性溶剂中进行的。

11．根据权利要求8至10中任一项所述的方法，其特征在于，第二步中的还原是利用碱金属或碱土金属的硼氢化物、碱金属或碱土金属铝氢化物和/或Vitride进行的。