[发明专利]无融合生殖种子的产生方法

权利要求书

1．一种产生无融合生殖种子的方法，该方法包括以下步骤：

(ⅰ)利用编码一种蛋白质的核苷酸序列转化植物材料，所说的蛋白质在细胞中或细胞膜中存在时，使得所说的细胞变为胚发生性的，

(ⅱ)使转化材料再生成为植物体，或者其包含心皮的部分，以及

(ⅲ)在胚囊附近表达序列。

2．按照前面的权利要求的方法，其中所说的无融合生殖种子是无定形胚芽型。

3．按照前面任一权利要求的方法，其中所说的序列表达产生能够跨越植物细胞膜的蛋白激酶。

4．按照前面的权利要求的方法，其中所说的激酶能够自身磷酸化。

5．按照前面任一权利要求的方法，其中所说的蛋白质是同激酶一样的富含亮氨酸重复单位的受体，包含配体结合结构域，脯氨酸盒，跨膜结构域，激酶结构域和蛋白质结合结构域。

6．按照前面的权利要求的方法，其中所说的蛋白质缺少功能性配体结合结构域，但包含脯氨酸盒，跨膜结构域，激酶结构域和蛋白质结合结构域。

7．按照前面任一权利要求的方法，其中一旦掺入到细胞膜，蛋白质结合结构域即在细胞内定位。

8．按照前面任一权利要求的方法，其中所说的序列还编码细胞膜靶向序列。

9．按照前面任一权利要求的方法，其中所说的序列是在SEQ ID Nos.1或2中描述的序列或者是互补于在严格条件下与所说序列杂交并且编码具激酶活性的膜结合蛋白质之序列的序列。

10．按照前面任一权利要求的方法，其中所说的序列被修饰，由此除去已知的mRNA不稳定性序列基元或聚腺苷酸化信号，和/或利用插入所说序列之植物的优选密码子，以便在所说植物中这种修饰的序列的表达产生蛋白质，该蛋白质本质上类似于在有机体(其中蛋白质是内源性的)中表达未修饰序列获得的蛋白质。

11．按照前面任一权利要求的方法，其中序列的表达在一个诱导型或者发育调节型启动子的控制之下。

12．按照前面权利要求的方法，其中的序列表达处于下列启动子之一的控制之下：植物中调节SERK基因表达的启动子，胡萝卜壳多糖酶DcEP3-1基因启动子，Arabidopsis AtChitⅣ基因启动子，ArabidopsisLTP-1基因启动子，Arabidopsis bel-1基因启动子，矮牵牛花fbp-7基因启动子，Arabidopsis ANT基因启动子，来自Phalaenopsis的O126基因启动子。

13．按照前面任一权利要求的方法，其中所说的序列在胚囊，子房壁，珠心，或者珠被的体细胞中表达。

14．按照前面任一权利要求的方法，其中所说的无融合生殖种子内的胚乳来自胚囊内的极性核与授粉雄配子核子的融合。

15．按照前面权利要求的方法，其中编码蛋白质序列的表达先于极性核与雄配子核子的融合。

16．包含编码一种蛋白质的序列的DNA，所说的蛋白质在细胞中或细胞膜中存在时，使得所说的细胞变为胚发生性的。

17．按照权利要求16的DNA，其中所说的蛋白质是同激酶一样的富含亮氨酸重复单位的受体，包含配体结合结构域，脯氨酸盒，跨膜结构域，激酶结构域及蛋白质结合结构域，配体结合结构域(可以是可以不是缺失或者功能上失活的)。

18．按照权利要求16或17的DNA，其包含编码有下列氨基酸序列的N端蛋白质片段的DNA序列：Gln Ser Trp Asp Pro Thr Leu Val AsnPro Cys Thr Trp Phe His Val Thr Cys Asn。

19．按照权利要求18的DNA，其包含编码有下列氨基酸序列的N端蛋白质片段的DNA序列：Val Xaa Gln Ser Trp Asp Pro Thr Leu ValAsn Pro Cys Thr Trp Phe His Val Thr Cys AsnXaa是一种可变氨基酸，但优选Leu或Val。